Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин. Тест иммунохроматографический для совместного выявления гемоглобина и трансферрина в кале Определение трансферрина и гемоглобина в кале

Трансферрин (Tf), сидерофилин – белок транспортирующий железо в организме к месту, где в этом химическом элементе есть необходимость. Не следует путать, однако, белковый комплекс, содержащий , который называется , и связывающий железо гликопротеин, принадлежащий β 1 -глобулиновой фракции – трансферрин.

Норма трансферрина в крови мужчин и женщин неодинакова и составляет:

  • 2,0 – 3,8 г/л для мужчин;
  • 1.85 – 4,05 г/л для женщин соответственно (верхняя граница этого показателя у представительниц слабого выше). С мочой в норме должно выводиться менее 2,4 мг/л переносящего Fe белка.

Учитывая, что для проведения анализа требуется специальное лабораторное оснащение, которым не все учреждения располагают, о концентрации транспортного белка судят по другому показателю (ОЖСС) – его называют общей железосвязывающей способностью сыворотки крови (ОЖСС), коэффициентом насыщения трансферрина железом или просто общим трансферрином. Эта величина обычно колеблется между границами 25 – 30%, хотя по данным различных источников разбежка значений может быть более широкой (10 – 50%).

Что такое трансферрин и откуда он берется?

Железо, поступающее с продуктами питания в желудочно-кишечный тракт, как правило, пребывает в трехвалентной форме (Fe +++), однако, чтобы полноценно всосаться в кишечнике, оно должно восстановиться до двухвалентной формы (Fe ++), что и происходит под влиянием многочисленных факторов (витамин С, ферменты, микрофлора кишечника и пр.). После того, как трехвалентное железо станет двухвалентным, в клетках слизистой оболочки 12-перстной кишки оно опять должно вернуться в исходную форму (Fe +++), которая позволяет ему соединиться с ферритином и с помощью специфического белка трансферрина уйти по назначению (в органы и ткани).

Для насыщения трансферрина железом в молекуле транспортного белка находятся специальные участки (пространства), готовые принять ионы Fe. В зависимости от этого в организме транспортный белок может присутствовать и перемещаться в одной из четырех различных форм, каждая из которых выделяет свое место для железа:

  • Апотрансферрин;
  • Моножелезистый трансферрин А (феррум занимает исключительно А-пространство);
  • Моножелезистый трансферрин В (локализация железа распространяется только на В-пространство;
  • Дижелезистый транферрин (оба пространства заняты железом).

На молекуле транспортного белка может поместиться 2 иона железа и когда трансферрин, несущий эти ионы, на своем пути встречается с клеткой, имеющей на своей поверхности похожий на бабочку трансферриновый рецептор, он непременно «заметит» его, свяжется, проникнет внутрь клетки и отдаст ей железо, отделив его от себя. Следует отметить, что транспортный белок, доставив данный химический элемент, не отдает его (Fe) всем подряд, каждое железосвязывающее пространство наделяет железом свою конкретную ткань: эритрон и плацента пользуются железом А-пространства, печень и другие органы принимают Fe от пространства В.

Насыщение трансферрина железом осуществляется в области, ответственной за всасывание этого химического элемента в организме, то есть, преимущественно в слизистой 12-перстной кишки, или в местах гибели эритроцитов во время переваривания их макрофагами.

Другие способности транспортного белка

Трасферрин, обладая способностью соединяться с ионами трехвалентного железа, занимается не только тем, что доставляет данный металл в органы и ткани про запас (ферритин) или в костный мозг для участия в эритропоэзе (синтез красного пигмента крови, в новых красных кровяных тельцах):

  1. Он «умеет узнавать» (молодые эритроциты), которые заняты синтезом гемоглобина.
  2. Важная задача трансферрина состоит и в том, чтобы подобрать освободившиеся после распада (и соответственно – находящегося в них гемоглобина) ионы трехвалентного железа, которые в свободном состоянии представляют опасность для организма из-за высокой токсичности.
  3. Трансферрин, входя в состав β-глобулиновой фракции, относится к белкам острой фазы. Он принимает участие в обеспечении иммунного ответа, запрограммированного от рождения. Основное место постоянного пребывания трансферрина – слизистая оболочка, где он, «выискивая» и связывая железо, лишает возможности использования его попавшими туда патогенными микроорганизма и тем самым создает им неприемлемые для жизни условия.
  4. Способность трансферрина связывать металлы оказывается не очень полезной при попадании в организм плутония, которого транспортный белок связывает вместо железа и уносит его «про запас» в кости.

Главные производители трансферрина в организме – печень и головной мозг. Ген, отвечающий за продукцию «транспортного средства» для феррума, располагается на третьей хромосоме. Резкий дефицит (до полного отсутствия) транспортного белка являет собой тяжелую, но, к счастью, редкую наследственную патологию (аутосомно-рецессивный путь), сопровождаемую выраженной гипохромной анемией и называемую атрансферринемией.

Определение белка, транспортирующего железо

Анализ транферрина производят в пробе плазмы или сыворотки крови, взятой, как и все биохимические анализы, утром, на голодный желудок. Между тем, методики исследования транспортного белка создают определенные трудности, поскольку требуют участия специального лабораторного оборудования и не всегда доступных тест-наборов. Однако отсутствие оснащения не предполагает отказ в анализе на Tf, пациент в любом случае не останется без обследования.

Альтернативным способом решения данной проблемы считают определение коэффициента насыщения трансферрина железом – анализ, который больше известен как общая железосвязывающая способность (ОЖСС) сыворотки (плазмы) крови, указывающая на концентрацию трансферрина в крови. В общем, сколько железа трансферрин связал, таким его количеством и насытился. В процентном выражении у здоровых людей эта величина составляет не менее 25 – 30%. Это значит, что при нормальном состоянии организма приблизительно 35% Tf должно быть задействовано в связывании и переносе железа к органам и тканям.

Чаще всего в определении трансферрина возникает необходимость при дифдиагностике различных железодефицитных состояний, сопровождающихся:

  • Сниженной концентрацией сывороточного железа;
  • Повышенным содержанием транспортного белка;
  • Пониженным уровнем насыщения трансферрина железом.

Нормы транспортного белка и степень насыщения трансферрина железом удобно показать в таблице, которую мы приводим ниже. Между тем, читателю следует иметь в виду, что диапазон референсных значений в зависимости от места проведения анализа может сужаться или расширяться, поэтому сравнение результатов определения того или иного показателя нужно производить в соответствии с данными лаборатории, осуществляющей исследование.

У лиц женского пола особые отношения и с железом, и с его транспортом, поэтому переносящего Fe белка у них приблизительно на 10% больше, чем у ровесников мужского пола. При беременности (III триместр) можно ожидать повышенный в 1,5 раза уровень трансферрина, в то время как в преклонном возрасте его концентрация, наоборот – понижена и уже совсем не имеет половой принадлежности. При воспалительных процессах трансферрин выступает в качестве негативного острофазного белка, его уровень при воспалении – понижен.

Кроме этого, определение трансферрина в крови можно производить и в других единицах – мкмоль/л, тогда норма его для взрослых будет располагаться в границах 23 – 43 мкмоль/л (у лиц мужского пола) и 21 – 46 мкмоль/л (у «слабой» половины). Аналогично обстоит дело и с общим трансферрином (ОЖСС) в крови, норма которого, выраженная в тех же единицах, что и Tf, будет составлять 26,85 – 41,17 мкмоль/л. Насыщение трансферрина железом у беременных женщин возрастает созвучно снижению содержания самого железа в крови.

Трансферрин в анализе

Повышенный уровень трансферрина можно ожидать в следующих случаях:

Пониженный трансферрин обнаруживается при таких патологических состояниях:

  • Различные воспалительные процессы с хроническим течением;
  • Злокачественные новообразования;
  • Заболевания печени (цирроз, гепатиты), что вполне естественно, ведь именно этот орган является главным производителем трансферрина;
  • Потеря белка организмом (обширные термические и химические ожоги, нефротический синдром);
  • Употребление андрогенных препаратов и глюкокортикоидов;
  • Наследственные аномалии (атранферринемия);
  • Чрезмерное поступление железа в организм (массивные переливания крови);
  • Заболевания, влекущие повышение онкотического давления (множественная миелома, гепатоцеллюлярная патология);
  • Гемохроматоз (генетическая патология, результатом которой становится обусловленная чрезмерным всасыванием железа в ЖКТ триада синдромов – необычная окраска кожных покровов, слизистых и внутренних органов, цирроз печени, диабет);
  • Гиперхромная анемия;

Определение ОЖСС

Повышенные или пониженные значения ОЖСС не значит, что в этих же случаях будет повышен или понижен уровень Tf. Наличие трансферрина не увеличивает его связывание с железом или, напротив, низкий уровень транспортного белка не уменьшает его связывающие способности. Сложный механизм, происходящий при усвоении, распределении и потреблении железа затруднительно представить в маленькой статье, поэтому мы приведем сведения, информирующие о патологических состояниях, при которых уровень ОЖСС повышен или понижен.

Повышают общую связывающую способность :

  1. ЖДА (железодефицитная анемия);
  2. Гормональные противозачаточные препараты;
  3. Повреждение гепатоцитов (клеток печени) при острых воспалительных заболеваниях (гепатит) и циррозе;
  4. Чрезмерная нагрузка организма железом (диета, ферротерапия продолжительное время);
  5. Частые гемотрансфузии;
  6. Гемохроматоз;
  7. Беременность (в поздних сроках, ближе к родам);
  8. Детский возраст.

Пониженный показатель ОЖСС отмечается в случаях :

  • Уменьшения концентрация общего протеина, что нередко является следствием голодных диет, злокачественных новообразований, нефротического синдрома;
  • Хронического влияния какого-то инфекционного агента, постоянно «проживающего» в организме;
  • Гемосидероза, как результата многочисленных переливаний крови;
  • Железодефицитных состояний.

Коэффициент насыщения трансферрина железом зависит от концентрации Fe в организме: при переизбытке железа – показатель ОЖСС и в числовом, и в процентном выражении будет повышен. Это происходит при патологических состояниях, влекущих усиленный распад эритроцитов и повышенный гемолиз, или при отравлении железом, если лечение препаратами Fe оказывается излишне активным.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления гемоглобина (скрытой крови) и/или трансферрина в кале.

Краткая информация

Анализ кала на скрытую кровь используют для выявления различных видов патологии нижних отделов желудочно-кишечного тракта, характеризующихся кровотечениями (полипы толстого кишечника, колоректальный рак, болезнь Крона, язвенный колит). Сосуды на поверхности колоректального полипа или злокачественного новообразования часто бывают хрупкими и легко повреждаются при прохождении каловых масс. При этом в фекалии выделяется небольшое количество крови, которое редко заметно на глаз.

Трансферрин – гликозилированный белок, осуществляющий транспорт ионов железа, – является производным компонентом крови и может попадать в желудочно-кишечный тракт и потом выводиться с калом в случае заболеваний, которые сопровождаются кровотечением из желудочно-кишечного тракта. Трансферрин стабилен в кале.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» одновременно определяет гемоглобин и трасферрин в образцах кала, позволяя выявлять кровотечения из верхних и нижних отделов желудочно-кишечного тракта.

Принцип метода

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце гемоглобина и/или трансферрина они вступают в реакцию с нанесенными на стартовую зону тест-полоски специфическими моноклональными антителами против гемоглобина и трансферрина, меченными окрашенными частицами, и продолжают движение с током жидкости. В аналитических зонах тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами против гемоглобина и трансферрина, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенных иммунных комплексов.

В контрольной зоне тест-полоски специфические окрашенные иммунные комплексы образуются независимо от наличия в тестируемом биологическом материале гемоглобина и/или трансферрина.

В том случае, если в анализируемом образце присутствует гемоглобин и трансферрин, на тест-полоске образуются три параллельные окрашенные линии (красная и синяя аналитические, обозначенные буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа по обоим белкам. В случае отсутствия в анализируемом образце гемоглобина и трансферрина на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа по обоим белкам.

Состав

Один комплект тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» включает:

  • тест-полоски иммунохроматографические «РЭД скрытая кровь-трансферрин» в кассетах из пластика белого цвета – 5, 10 или 20 шт.;
  • пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
  • этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем – 5, 10 или 20 шт., соответственно;
  • инструкцию по применению теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» – 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.

Комплект тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» упакован в картонную коробку.

Необходимые оборудование и материалы, не входящие в состав набора

  • контейнеры для сбора образцов кала;
  • одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
  • часы или таймер.

Аналитические характеристики

  • Чувствительность теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» составляет >99% по гемоглобину и >99% по трансферрину.
  • Специфичность теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» составляет >99% по гемоглобину и >99% по трансферрину.
  • Время проведения анализа – 10 мин.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» специфичен по отношению к гемоглобину и трансферрину человека и не дает перекрестных реакций с гемоглобином, миоглобином и трансферрином животного происхождения, поступающими с пищей.

Каждый тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен для одного определения наличия гемоглобина и/или трансферрина в кале человека.

Меры предосторожности

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен только для in vitro диагностики.

Все компоненты теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» в используемых концентрациях являются нетоксичными.

Не следует использовать тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» после истечения срока годности.

При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать как потенциально инфицированные.

Использованные тесты и остатки биологического материала должны быть помещены в специальный контейнер для санитарных отходов.

Анализируемые образцы

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2–4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения – при температуре –20°С и ниже.

Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

Подготовка образцов

1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество (10-20 мг) анализируемого образца кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, пипеткой отобрать 10-20 мкл.

2. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).

3. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).

Проведение анализа

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15–25°С).

4. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.

5. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.


6. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты, обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе с жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

7. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

Интерпретация результатов

Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала гемоглобина и трансферрина (рис. 3-1).

Выявление в тестовом окошке кассеты трех параллельных окрашенных линий (зеленой, красной и синей) свидетельствует о положительном результате анализа по обоим белкам, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина и трансферрина (рис. 3-2). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой и красной) свидетельствует о положительном результате анализа по трансферрину, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала трансферрина и отсутствие гемоглобина (рис. 3-3). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой и синей) свидетельствует о положительном результате анализа по гемоглобину, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина и отсутствие трансферрина (рис. 3-4). Интенсивность окраски красной и синей аналитических линии может меняться в зависимости от концентраций, соответственно, трансферрина и гемоглобина в образце.

В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только красная и/или синяя аналитические линии, результат анализа признается недействительным (рис. 3-5). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».


Образцы кала, забранные у пациентов с кровоточащим геммороем, запорами, а также в период менструации, могут показать ложноположительные результаты.

Результаты, полученные с использованием теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.

Условия хранения и эксплуатации

Тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» должны храниться при температуре от 2 до 25°С в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» не допускается.

Срок годности тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» – 24 мес. с даты изготовления.

После вскрытия упаковки тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» должны быть использованы в течение 2 ч при хранении в сухом месте при комнатной температуре.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение Инструкции по применению теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Назначение

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен для in vitro одноэтапного быстрого качественного выявления гемоглобина (скрытой крови) и/или трансферрина в кале.

Краткая информация

Анализ кала на скрытую кровь используют для выявления различных видов патологии нижних отделов желудочно-кишечного тракта, характеризующихся кровотечениями (полипы толстого кишечника, колоректальный рак, болезнь Крона, язвенный колит). Сосуды на поверхности колоректального полипа или злокачественного новообразования часто бывают хрупкими и легко повреждаются при прохождении каловых масс. При этом в фекалии выделяется небольшое количество крови, которое редко заметно на глаз.

Трансферрин - гликозилированный белок, осуществляющий транспорт ионов железа, - является производным компонентом крови и может попадать в желудочно-кишечный тракт и потом выводиться с калом в случае заболеваний, которые сопровождаются кровотечением из желудочно-кишечного тракта. Трансферрин стабилен в кале.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» одновременно определяет гемоглобин и трасферрин в образцах кала, позволяя выявлять кровотечения из верхних и нижних отделов желудочно-кишечного тракта.

Принцип метода

Определение основано на принципе иммунохроматографического анализа. Анализируемый образец жидкого биологического материала абсорбируется поглощающим участком тест-полоски. При наличии в образце гемоглобина и/или трансферрина они вступают в реакцию с нанесенными на стартовую зону тест-полоски специфическими моноклональными антителами против гемоглобина и трансферрина, меченными окрашенными частицами, и продолжают движение с током жидкости. В аналитических зонах тест-полоски происходит взаимодействие со специфическими моноклональными антителами против гемоглобина и трансферрина, иммобилизованными на поверхности мембраны, с образованием окрашенных иммунных комплексов.

В контрольной зоне тест-полоски специфические окрашенные иммунные комплексы образуются независимо от наличия в тестируемом биологическом материале гемоглобина и/или трансферрина.

В том случае, если в анализируемом образце присутствует гемоглобин и трансферрин, на тест-полоске образуются три параллельные окрашенные линии (красная и синяя аналитические, обозначенные буквой Т, и зеленая контрольная, обозначенная буквой С), что указывает на положительный результат анализа по обоим белкам. В случае отсутствия в анализируемом образце гемоглобина и трансферрина на тест-полоске образуется одна зеленая контрольная линия (С), что указывает на отрицательный результат анализа по обоим белкам.

Состав

Один комплект тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» включает:

  • тест-полоски иммунохроматографические «РЭД скрытая кровь-трансферрин» в кассетах из пластика белого цвета - 5, 10 или 20 шт.;
  • пробирки с крышкой-капельницей и стержнем для забора образца кала, содержащие буфер для растворения образца - 5, 10 или 20 шт., соответственно;
  • этикетки на клеевой основе для маркировки пробирок пользователем - 5, 10 или 20 шт., соответственно;
  • инструкцию по применению теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» - 1 шт.

Кассеты с тест-полосками упакованы в индивидуальные вакуумные упаковки из фольги алюминиевой, содержащие пакетики с силикагелем.

Комплект тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» упакован в картонную коробку.

Необходимые оборудование и материалы, не входящие в состав набора
  • контейнеры для сбора образцов кала;
  • одноразовые резиновые или пластиковые перчатки;
  • часы или таймер.
Аналитические характеристики
  • Чувствительность теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» составляет >99% по гемоглобину и >99% по трансферрину.
  • Специфичность теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» составляет >99% по гемоглобину и >99% по трансферрину.
  • Время проведения анализа - 10 мин.

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» специфичен по отношению к гемоглобину и трансферрину человека и не дает перекрестных реакций с гемоглобином, миоглобином и трансферрином животного происхождения, поступающими с пищей.

Каждый тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен для одного определения наличия гемоглобина и/или трансферрина в кале человека.

Меры предосторожности

Тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин» предназначен только для in vitro диагностики.

Все компоненты теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин» в используемых концентрациях являются нетоксичными.

Не следует использовать тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» после истечения срока годности.

При проведении определения следует надевать одноразовые резиновые или пластиковые перчатки, т.к. исследуемые образцы биологического материала следует рассматривать как потенциально инфицированные.

Использованные тесты и остатки биологического материала должны быть помещены в специальный контейнер для санитарных отходов.

Анализируемые образцы

Свежесобранный биологический материал (кал), не содержащий консерванты.

Образцы кала должны быть собраны в чистый контейнер.

Образцы кала до определения можно хранить при температуре 2-4°С не более 2 сут., при необходимости более длительного (до 1 года) хранения - при температуре -20°С и ниже.

Перед анализом образцы кала должны быть полностью разморожены и доведены до комнатной температуры.

Повторное замораживание и оттаивание образцов недопустимо.

Подготовка образцов

1. Снять крышку-капельницу с пробирки и с помощью стержня на крышке взять небольшое количество (10-20 мг) анализируемого образца кала (рис. 1-1). Если образец жидкий, пипеткой отобрать 10-20 мкл.

2. Ввести стержень с образцом в пробирку с буфером для растворения образца и плотно завинтить крышку-капельницу (рис. 1-2).

3. Несколько раз встряхнуть пробирку, чтобы облегчить растворение образца (рис. 2-1).

Проведение анализа

Анализируемые образцы кала и тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» перед проведением анализа должны быть доведены до комнатной температуры (15-25°С).

4. Встряхнуть пробирку с раствором образца (рис. 2-1). Отрезать или отломить кончик крышки-капельницы.

5. Непосредственно перед началом анализа вскрыть упаковку теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин», разрывая ее вдоль прорези. Извлечь кассету с тест-полоской и положить ее на ровную горизонтальную поверхность.


6. 4 капли (примерно 100 мкл) жидкого образца внести в круглое окошко кассеты, обозначенное буквой S, избегая попадания твердых частиц образца вместе с жидкостью (рис. 2-2). Для каждого образца или контроля необходимо использовать отдельную пробирку с буфером для растворения образца и отдельный тест «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

7. Через 10 мин визуально оценить результат реакции.

Интерпретация результатов

Выявление в тестовом окошке кассеты одной зеленой контрольной линии (С) свидетельствует об отрицательном результате анализа, т.е. указывает на отсутствие в анализируемом образце кала гемоглобина и трансферрина (рис. 3-1).

Выявление в тестовом окошке кассеты трех параллельных окрашенных линий (зеленой, красной и синей) свидетельствует о положительном результате анализа по обоим белкам, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина и трансферрина (рис. 3-2). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой и красной) свидетельствует о положительном результате анализа по трансферрину, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала трансферрина и отсутствие гемоглобина (рис. 3-3). Выявление в тестовом окошке кассеты двух параллельных окрашенных линий (зеленой и синей) свидетельствует о положительном результате анализа по гемоглобину, т.е. указывает на наличие в анализируемом образце кала гемоглобина и отсутствие трансферрина (рис. 3-4). Интенсивность окраски красной и синей аналитических линии может меняться в зависимости от концентраций, соответственно, трансферрина и гемоглобина в образце.

В тех случаях, когда в тестовом окошке кассеты не образуется ни одной окрашенной линии или образуются только красная и/или синяя аналитические линии, результат анализа признается недействительным (рис. 3-5). При этом анализ следует повторить с использованием другого теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Избыточное количество образца кала может привести к появлению в тестовом окошке кассеты нечетких линий темного цвета, которые не имеют диагностического значения. В этом случае следует добавить в образец кала бoльшее количество растворителя и повторить анализ с использование другого теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».


Образцы кала, забранные у пациентов с кровоточащим геммороем, запорами, а также в период менструации, могут показать ложноположительные результаты.

Результаты, полученные с использованием теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин», являются предварительными. Для их подтверждения необходимо проведение дополнительных исследований образцов кала с использованием альтернативных методов.

Условия хранения и эксплуатации

Тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» должны храниться при температуре от 2 до 25°С в упаковке предприятия-изготовителя в сухом месте в течение всего срока годности. Замораживание тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» не допускается.

Срок годности тестов «РЭД скрытая кровь-трансферрин» - 24 мес. с даты изготовления.

После вскрытия упаковки тесты «РЭД скрытая кровь-трансферрин» должны быть использованы в течение 2 ч при хранении в сухом месте при комнатной температуре.

Для получения надежных результатов необходимо строгое соблюдение Инструкции по применению теста «РЭД скрытая кровь-трансферрин».

Онкоскрининги

Общая характеристика

Качественное определение гемоглобина и трансферрина человека в кале с целью обнаружения желудочно-кишечного кровотечения любой этиологии. «Скрытой» называют кровь, которая не изменяет цвет кала и не определяется макро- и микроскопически.
Человеческий гемоглобин в кале является высокоспецифичным исследованием для диагностики кровотечений из нижних отделов ЖКТ, т.к. гемоглобин – нестабильное соединение, он разрушается по мере прохождения по кишечнику и при кровотечениях в желудке, верхних отделах кишечника возможно получение «ложноотрицательных» результатов.
Трансферрин - белок крови, который попадает в просвет кишечника только при заболеваниях, сопровождающихся кровотечениями в ЖКТ и является более стабильным соединением, позволяющий с высокой степенью достоверности выявлять кровотечения в верхних отделах ЖКТ.
Исследование не дает перекрестных реакций с гемоглобином и трансферрином животного происхождения, поэтому перед исследованием пациенту не нужно исключать мясо из рациона питания.

Показания для назначения

1. Раннее скрининговое исследование для диагностики колоректального рака, включая профилактические осмотры в возрасте после 50 лет.
2. Неинвазивная диагностика скрытых кровотечений ЖКТ, отбор пациентов для эндоскопического исследования.
3. Дифференциальная диагностика анемий.
4. Диагностика заболеваний ЖКТ: полипоза кишечника, дивертикулита, язвенного колита, некротизирующего энтероколита у детей раннего возраста и др.
5. При обнаружении гельминтов – для оценки повреждения слизистых ЖКТ.
6. Оценка адекватности терапии язвенной болезни желудка, неспецифического язвенного колита, болезни Крона, туберкулёза кишечника и др.

Маркер

Маркер диагностики скрытых кровотечений из верхних и нижних отделов ЖКТ.

Клиническая значимость

Своевременное определение «скрытого» кровотечения крайне важно для диагностики целого ряда тяжелых заболеваний желудочно-кишечного тракта (ЖКТ), в том числе онкологических:
1. Первичные и метастатические опухоли ЖКТ
2. Язвенные повреждения слизистой ЖКТ
3. Дивертикулит
4. Туберкулёз кишечника
5. Неспецифический язвенный колит, болезнь Крона, некротизирующие энтероколиты
6. Гельминтозы с повреждением слизистой кишечника
7. Инфекционные поражения кишечника.


Состав показателей:

Гемоглобин

Метод : Иммунохроматографический

Референтные значения:

Комментарии

Трансферрин

Метод : Иммунохроматографический

Референтные значения:

Комментарии

Выполнение возможно на биоматериалах:

Биологический материал

Условия доставки

Контейнер

Условия доставки:

24 Час. при температуре от 2 до 8 градусов Цельсия

Контейнер:

Одноразовый контейнер с герметичной крышкой и л/ш

Правила подготовки пациента

Собрать достаточное количество самопроизвольного кала (1-2 г или мл, если образец жидкий).
Образцы должны храниться в чистой сухой емкости (без консервантов или транспортных сред).
Доставка БМ в МЛ "ДІЛА" пациентом после сбора в течение 2-х часов. Не требуется соблюдения предварительной диеты.
Не следует собирать биоматериал в период менструации, при наличии кровоточащего геморроя, крови в моче или после значительных усилий при дефекации.
Исследование не следует проводить в течение 2-х недель после проведения инструментальных исследований желудочно-кишечного тракта или медицинских процедур, которые могут вызвать механические повреждения слизистой (например, колоноскопия, ректороманоскопия, очищение кишечника с помощью клизм и пр.).

Интерференция:

  • Возможны «ложноположительные результаты» при попадании в пробу человеческой крови из других источников кровотечения (менструальная кровь, кровоточащий геморрой, механические повреждения слизистой при колоноскопия, ректороманоскопия, очищение кишечника с п

Интерпретация:

  • В пробе обнаружен человеческий гемоглобин и/или трансферрин - «положительно», что сведетельствует о наличии повреждений слизистой оболочки ЖКТ.
    Следует помнить, что результаты должны оцениваться в комплексе с другими клинико-инструментальными исследованиями, так как сами по себе не могут быть единственным критерием для постановки диагноза.
  • Результат - «отрицательно» свидетельствует об отсутствие данных в пользу кровотечений в ЖКТ.
    Следует помнить, что результаты должны оцениваться в комплексе с другими клинико-инструментальными исследованиями, так как сами по себе не могут быть единственным

Анемия встречается у людей довольно часто, выявляют ее при сдаче анализа крови. Понижение уровня гемоглобина в крови может быть связано с болезнью внутренних органов (печени, почек, желудка). Женщины во время вынашивания ребенка также встречаются с диагнозом “анемия”, поэтому им назначают диету с повышенным содержанием железа. У детей в период бурного роста может наблюдаться нехватка в организме витаминов и микроэлементов, что связано с неполноценным питанием и особенностями детского организма.

Почему возникает заболевание

Причины возникновения анемии следующие:

  • измененный кровоток, обусловленный пониженным проникновением в организм веществ, осуществляющих деятельность в кровотоке фолиевой кислоты, цинка, железа, меди. К дефицитным анемиям относят железодефицитную болезнь, фолиеводефицитную;
  • длительная утрата крови, связанная с внутренними желудочно-кишечными кровотечениями, у женщин – с гинекологическими нарушениями (обильными и продолжительными менструациями). В результате длительной кровопотери происходит развитие хронической постгеморрагической анемии;
  • интенсивное разделение эритроцитов – происходит быстрый распад клеток крови, костный мозг не может возместить их утрату интенсивным формированием новых клеток. Данные анемии называют гемолитическими.

Признаки недуга

У анемии нет типичных и характерных ей выражений. Все признаки расплывчатые и неясные, отмечаются при иных заболеваниях, потому их соединили в анемический синдром.

При заболевании нервной системы проявляются следующие симптомы:

  • усталость, понижение работоспособности и физической активности;
  • частые приступы головной боли;
  • головокружение и шум в ушах;
  • потеря концентрации внимания;
  • нарушена чувствительность;
  • ощущение ползания мурашек на коже конечностей.

Расстройство сердечной и сосудистой системы проявляется одышкой при физической нагрузке, возникает учащенное сердцебиение.

Костно-мышечная система также страдает: возникает слабость в руках, быстрая утомляемость, непереносимость физических нагрузок.

Для кожного покрова свойственно проявление таких симптомов:

  • бледность;
  • бледная слизистая ротовой полости, конъюнктива, ногтевое ложе имеет голубой, желтый, зеленый оттенок в зависимости от типа анемии;
  • заеды и болезненные раны по углам ротовой полости;
  • выпадение волос;
  • качество ногтей, волос, кожи снижается. Ногти слоятся, ломаются, волосы начинают редеть, кожа выглядит бледной, анемичной;
  • нарушается процесс глотания, человек ощущает сухость в горле и болезненность.

К другим признакам анемии относят:

  • вялый внешний вид;
  • изменение и извращение вкусовых ощущений;
  • снижение веса;
  • длительный период восстановления после простудных заболеваний;
  • увеличение лимфоузлов.

Возникают признаки недуга не сразу, болезнь медленно прогрессирует. При сдаче анализа крови выявляется причина болезненного состояния.


Какие анализы показаны при анемии

Анализы при анемии назначает врач:

1. Общее исследование крови

Данный способ диагностики заключается в изучении всех видов клеток крови, в установлении соответствия их объема к жидкой части крови, определение показателя гемоглобина, лейкоцитарной формулы.

При заболевании выявляются следующие показатели общего исследования крови:

  • уровень эритроцитов, средний объем и размещение по нему;
  • гемоглобин;
  • ретикулоциты;
  • гематокрит – соответствие кровяных клеток к плазме;
  • среднее наличие и скопление гемоглобина в эритроците;
  • показатель лейкоцитов;
  • показатель тромбоцитов.

Данное исследование помогает оценить функцию внутренних органов и систем организма.

Биохимия подразумевает исследование следующего ряда показателей:

  • уровень ферритина, который устанавливает в организме запасы железа;
  • трансферрин – белок, который перемещает железо;
  • сывороточное железо – выявляет показатель железа в сыворотке кровеносной системы;
  • способность сыворотки связывать железо в крови;
  • показатель витамина B2, фолиевой кислоты;
  • показатель билирубина.

3. Кал на скрытую кровь

Диагностика позволяет определить присутствие кровотечения в желудке и кишечнике. Перед сдачей анализов за 3 дня больному следует питаться по диете, не употребляя продукты с содержанием железа (яблоки, печень). Также исключить прием некоторых медикаментов (слабительные, средства против воспаления, лекарства железа).

Анализ каловых масс проводится при помощи бензидиновой, гваяковой пробы.

Ответ окрашивания бывает:

  • слабоположительный;
  • положительный;
  • резко положительный.

Результаты исследования больного сопоставляют с референтными границами, которые указаны в формуляре анализа каждого больного согласно с полом и возрастом.

Независимо от возрастной категории самым подходящим анализом при малокровии является кровь из вены.

Самостоятельно малокровие не возникает, а является следствием основного недуга, потому определение пониженного показателя эритроцитов и гемоглобина требует осуществления детальной диагностики для обнаружения причины.

Различают несколько классификаций заболеваний, встречающиеся довольно часто. При правильной постановке диагноза иустранения фактора болезни, большая часть анемий поддается корректировке. Мерой выздоровления является не только улучшение самочувствия больного, но и налаживание биохимических и гематологических показателей.

Железодефицитная болезнь

Данный вид анемии встречается у подавляющего большинства больных с диагнозом “анемия”. Характеризуется понижением количества гемоглобина, которое связано с низким показателем железа в кровеносной системе.

Железо, которое требуется для соединения новых молекул гемоглобина и иных веществ, организм больше всего берет из разбитых эритроцитов. Потеря железа на физиологическом уровне происходит с каловыми массами, потом, мочой, при месячных и кормлении грудью. При этом возможна компенсация железа продуктами, из которых железо хорошо усваивается. Чаще всего это мясо. Из растительных продуктов железо почти не всасывается. Передвигается оно по организму при помощи белка трансферрина, запасаясь в составе ферритина в печени, селезенке, костном мозге.

Дефицит железа имеет 3 этапа.

  1. Прелатентный дефицит – по итогам совокупного исследования крови уровень железа оказывается нормальным, понижен ферритин.
  2. Латентный дефицит – исследование крови в установленных границах, пониженный показатель железа, ферритина.
  3. Анемия – анализы крови указывают на понижение гемоглобина, железо сыворотки и ферритин понижены.


Почему понижается уровень железа

Зачастую железодефицитная анемия возникает по причине ряда факторов.

Хроническая кровопотеря характеризуется:

  • желудочными кишечными кровотечениями при таких недугах, как язва желудка, двенадцатиперстной кишки, геморрой, полипоз, дивертикулез, неспецифический язвенный колит;
  • маточная кровопотеря, которая возникает, если присутствует фибромиома матки, рак шейки, эндометриоз, дисфункция яичников, обильная менструация;
  • легочная кровопотеря – это бронхоэктатическое заболевание, рак, туберкулез, легочный гемосидероз;
  • гематурия - при наличии поликистоза почек, рака почек, полипах, опухоли мочевого пузыря;
  • кровотечения из носового хода при заболевании Рандю-Ослера;
  • гельминтоз.

Повышенное потребление железа происходит по таким причинам:

  • беременность, кормление грудью;
  • половое созревание – во время интенсивного роста мышц, менструации у девочек, при появлении раннего хлороза.

Изменение всасывания железа возникает при таких факторах:

  • мальабсорбция;
  • диетическое питание с низким присутствием железа, вегетарианское питание.

Фактор дефицита железа всегда должен быть установлен, чтобы не упустить формирование карциномы скрытой формы.

Карцинома - это ловушка для железа, которая способна забрать полностью его из крови. У взрослого дефицит железа зачастую проявляется утратой крови. Потому при отсутствии явных симптомов желудочной, кишечной, гинекологической кровопотери следует пройти эндоскопию.


Диагностика болезни

К основным диагностическим критериям железодефицитной анемии относят понижение насыщенности гемоглобина меньше 105 г/л у детей, женщин. Для мужчин меньше 135 г/л. Также понижается эритроцитарный индекс – средняя величина эритроцита меньше 80 фл, снижается сывороточный ферритин меньше 15 нг/мл.

Тяжелые случаи при данной анемии характеризуются полным отсутствием окрашенного железа в костном мозге.

Сывороточный ферритин - самый точный показатель железодефицитной болезни. При заболевании изначально понижается показатель ферритина. Это самый чувствительный и нестандартный тест, если не присутствует увеличения MCV (во время беременности, у младенца), нет недостатка витамина C.

Другие состояние не способны снизить показатель ферритина. Он приходит в норму по истечении 2-3 суток после начала лечения таблетками железа. В случае не увеличения уровня ферритина до 50 нг/мг, возможен низкий комплаенс, который развивается при невыполнении предписаний специалиста. Мальабсорбции – при заниженном всасывании железа из кишечника либо развивающейся утере железа.

На начальных проявлениях дефицита железа (баланс железа отрицательный, дефицит скрытый) анализ показывает:

  • сниженный уровень ферритина в сыворотке крови;
  • ОЖСС, клиническое исследование крови без симптомов анемии.

Дефицит железа без анемии:

  • снижен уровень ферритина;
  • увеличен ОЖСС;
  • исследование крови без патологии.

Анемия при нехватке железа:

  • снижен уровень ферритина;
  • увеличен ОЖСС;
  • анализ крови с признаками гипохромной микроцитарной анемии (снижен MHC, MCV, MCHC, показатель гемоглобина, гематокрита).

При данной анемии следует посетить гастроэнтеролога, женщинам обратиться к гинекологу.


Анемия при болезнях хронической формы

Для недуга свойственны долгие, вялотекущие инфекции, ревматические и опухолевые болезни. Прямое нарушение костного мозга отсутствует, нет нехватки железа и других микронутриентов.

Анемии хронических недугов занимают 2-е место после дефицитной.

При болезни из-за воздействия причин поражения в печени увеличивается синтез гепсидина, он координирует абсорбцию железа и его расходование из депо. Когда происходит воспалительный процесс, цитокины способствуют усилению формирования гепсидина, который понижает всасывание железа из двенадцатиперстной кишки, быстро ликвидирует его в запасы. Потому железо не добирается до костного мозга, находясь в ловушке.

Припрятывать железо желательно при острой инфекции, так как его используют бактерии для роста. Когда при хронических воспалениях, если не давать бактериям железо, его не приобретают и развивающиеся эритроциты. Возникает анемия при забитых хранилищах.

Развитие болезни происходит за 1-2 месяца. Тяжесть недуга зависит от тяжести болезни, которая вызвала анемию.

К основным симптомам болезни относят:

  • увеличение температуры;
  • усиленное выделение пота;
  • болевые ощущения суставов, мышц;
  • нежелание употреблять пищу.

Диагностика анемии и исследования включают в себя следующие характеристики:

  • показатель железа сыворотки крови понижен;
  • уровень ферритина в норме либо завышен;
  • трансферрин занижен либо нормальный;
  • ОЖСС понижен, нормальный;
  • растворимые рецепторы трансферрина нормальные.

Обязательно необходима консультация инфекциониста, ревматолога, чтобы назначить соответствующее лечение главной болезни. Лечение может быть неудачным, если был неправильно поставлен диагноз.



gastroguru © 2017