Мазок периферической крови: нормохромные эритроциты нормальных размеров, шистоцитов, дегмацитов (“надкусанных” клеток) или сфероцитов нет. Исследование окрашенных мазков крови, выведение лейкограммы

Общий клинический анализ крови включает в себя определение скорости оседания эритроцитов, количества гемоглобина, эритроцитов, вычисление цветового показателя, подсчет лейкоцитарной формулы, количества ретикулоцитов, тромбоцитов и описание особенностей морфологии клеток периферической крови.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ):

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ) в норме равна для мужчин 4-10 мм/ч, для женщин - 4-15 мм/ч. Она зависит от количества эритроцитов, их диаметра и объема, вязкости крови, содержания в плазме белковых фракций, желчных кислот и пигментов. При снижении температуры помещения, где проводятся исследования (менее 20 °С), СОЭ замедляется, при повышении - увеличивается.

Расшифровка СОЭ:

Скорость оседания эритроцитов не является показателем, специфическим для какого-либо определенного заболевания, однако ускорение СОЭ, как правило, указывает на появление патологического процесса в организме инфекционно-воспали-тельного характера (пневмония, абсцесс легкого, перитонит, пиелонефрит и т.
п.), инфекционно-аллергического характера (ревматизм, коллагенозы), опухолевого характера (рак, саркома, гемобластозы) и анемического характера.

Особенно выраженное ускорение СОЭ (60-80 мм/ч) характерно для парапротеинемических гемобластозов (миеломная болезнь, болезнь Вальденстрема). Замедление СОЭ наблюдается при полицитемии (увеличении количества эритроцитов) у больных эритремией, хронической пневмонией, язвенной болезнью желудка и луковицы двенадцатиперстной кишки и др. и при значительном сгущении крови. Особенностью детского возраста является снижение СОЭ у детей первой недели жизни.

Расшифровка содержания гемоглобина:

Уменьшение количества гемоглобина в крови является основным лабораторным симптомом анемий различной этиологии.
Содержание гемоглобина варьирует в широком диапазоне в зависимости от степени анемии и ее формы. Так, при железо-дефицитной анемии снижение гемоглобина обычно колеблется в пределах 85-110 г/л. Резкое снижение уровня гемоглобина характерно для острой кровопотери, гипопластической анемии, гемолитической анемии в стадии криза (45-80 г/л), увеличение концентрации гемоглобина (180-210 г/л) наблюдается при эритремии (для диагностики которой важно исследование количества эритроцитов, лейкоцитов, тромбоцитов, которые при этом заболевании повышаются), легочно-сердечной недостаточности и сгущении крови.

Фракции гемоглобина:

У здорового человека имеется три основных типа гемоглобина: примитивный - Р, фетальный - F, взрослый - А. Тип гемоглобина Р преобладает у плода до трехмесячного возраста, у новорожденного гемоглобин представлен на 20% типом F и соответственно на 80% типом А. У ребенка 4-5 месяцев гемоглобин F составляет 1-2% (как у взрослого человека).

Расшифровка:

Повышение значений гемоглобина F является важным диагностическим критерием для В -талассемии, но также имеет место при других гемолитических анемиях, гипопластической анемии, лейкозах.

Количество эритроцитов, норма:

Количество эритроцитов в норме у мужчин составляет 4,0-5,0 х 10 12/л, у женщин 3,5-4,5 х 10 12/л, .

Расшифровка:

Увеличение количества эритроцитов (эритроцитоз) наблюдается при эритремии (истинной полицитемии Вакеза), у больных с недостаточностью функции внешнего дыхания, например: при хронической пневмонии, пневмосклерозе, синдроме Хамана-Рича и др., а также у людей, проживающих в условиях высокогорного климата.
Уменьшение количества эритроцитов (эритроцитопения) чаще всего имеет место при анемиях в результате кровопотери (постгеморрагические анемии), дефицитных анемиях (железодефицитная, витамин В12-фолиево-дефицитная и др.), анемиях вследствие усиленного распада эритроцитов (гемолитические).

Цветовой показатель:

Цветовой показатель отражает среднее содержание гемоглобина в одном эритроците.

Расшифровка цветового показателя:

По цветовому показателю судят о том, каким является содержание гемоглобина в эритроцитах - нормальным, пониженным или повышенным, что имеет большое диагностическое значение в установлении характера анемии (нормохромная, гипохромная, гиперхромная). При нормальном насыщении эритроцитов гемоглобином цветовой показатель (ЦП) равен единице. У новорожденного ребенка ЦП в среднем составляет 1,2, на 2-3-й день жизни повышается до 1,3, далее снижается, достигая к третьему месяцу жизни величин, нормальных для взрослого (0,85-1,15).
Цветовой показатель менее 0,85 характерен для гипохромных анемий (железодефицитная анемия и др.), для нормохромных анемий составляет от 0,85 до 1,15, а гиперхромные анемии характеризуются ЦП более 1,15 (витамин В12-фолиево-дефицитная анемия, анемия Аддисона-Бирмера).

В диагностике анемии большую роль играет микроскопическое исследование эритроцитов, которое определяет ее характер, и решается на основании изменения величины, формы, окраски эритроцитов и наличия в них различных включений.

Диаметр эритроцитов:

Диаметр эритроцитов в норме составляет в среднем 7,5 мкм.

Расшифровка:

Изменение величины отдельных эритроцитов называется анизоцитозом, который является ранним признаком анемии. Однако у новорожденных анизоцитоз встречается в норме в течение первых 2-3 месяцев жизни. Эритроциты диаметром более 9 мкм называются макроцитами, менее б мкм - микроцитами. Макро-цитоз наблюдается при усиленной регенерации крови, дефиците витамина В12 и др., микроцитоз - при хронических кровопотерях, при дефиците железа.

Эритроциты:

Эритроциты в норме имеют дискообразную форму.

Расшифровка эритроцитов:

Когда эритроциты теряют свою нормальную дискообразную форму и становятся сферовидными, вытянутыми, веретенообразными, то эти изменения формы эритроцитов называют пойкилоцитозом, который указывает на более тяжелое течение заболевания и встречается чаще всего при гемолитических анемиях. При врожденной гемолитической анемии Минковского-Шоффара эритроциты имеют форму маленьких шариков (микросфероциты), при талассемии обнаруживаются эритроциты овальной формы (овалоциты), при серповидноклеточной анемии - серповидные эритроциты (дрепаноциты).

Окраска эритроцитов:

Окраска эритроцитов зависит от количества содержащегося в них гемоглобина и от величины красных кровяных клеток.

Расшифровка:

Эритроциты с нормальной окраской называются нормохромными, с менее интенсивной окраской - гипохромными, с более интенсивной - гиперхромными. Различие в окраске отдельных эритроцитов называют анизохромией. Гипохромия встречается при железодефицитной, хронической постгеморрагической, гипоапластической и некоторых миелотоксических анемиях. Гиперхромия наблюдается при витамин В12-фолиево-дефицитной анемии, пернициозоподобных и некоторых гемолитических анемиях (например, при микросфероцитарной анемии).

Полихроматофилия (появление в мазках крови клеток кроме розово-красных эритроцитов синего, фиолетового и переходных цветов) характерна для различных гемолитических анемий и является показателем регенераторной способности костного мозга в отношении продукции эритроцитов. В норме полихроматофилия встречается только у новорожденных (до 1,5 месяцев жизни). Обнаружение в мазках периферической крови ядерных эритроидных клеток - нормо-бластов - имеет аналогичное диагностическое значение, как полихроматофилия, и характерно для гемолитических анемий, метастазов опухоли в костный мозг. Гигантские ядерные эритроциты - мегалобласты, как и появление базофильной пунктации в эритроцитах связано с патологическим кроветворением.

Резистентность эритроцитов:

Резистентность эритроцитов - стойкость эритроцитов к различным воздействиям. При этом принято определять осмотическую резистентность эритроцитов. У здорового человека начало гемолиза в свежей крови отмечают при концентрации хлорида натрия 0,5-0,45%. А полный гемолиз при 0,4-0,35% раствора хлорида натрия.

Расшифровка:

Понижение осмотической резистентности эритроцитов, то есть появление гемолиза эритроцитов при более высокой, чем в норме концентрации раствора натрия хлорида (0,7-0,75%) наблюдается при наследственном микросфероцитозе, также при аутоиммунной гемолитической анемии. Повышение осмотической резистентности эритроцитов характерно для талассемии, гемоглобинопатии.

Ферментопатия эритроцитов:

Ферментопатия эритроцитов - исследование активности ферментов в эритроцитах. Наиболее распространенной наследственной ферментопатией эритроцитов является дефицит глюкозо-б-фосфатдегидрогеназы (Г-б-ФД). Для диагностики дефицита Г-б-ФД используют количественное определение активности ферментов в эритроцитах. У здоровых людей имеет место образование в эритроцитах единичных телец красного цвета(тельца Гейнца-Эрлиха).

Расшифровка:

В патологических Г-б-ФД эритроцитах появляется большее количество телец (4-6), которые также характерны и для передозировки сульфаниламидов, отравлении анилиновыми красителями, при дефиците других ферментов (глютатион-редуктазы, б-фосфоглюконатдегидрогеназы).

Ретикулоциты:

Ретикулоциты являются важным показателем регенераторной способности кроветворной ткани. В норме на 1000 эритроцитов приходится от 2 до 10 ретикулоцитов.

Расшифровка:

Увеличение ретикулоцитов в периферической крови наблюдается при гемолитических анемиях, особенно в период криза (количество ретикулоцитов может быть 20-30), острых кровопотерях, лечении железом железодефицитной анемии, витамином В12 и фолиевой кислотой витамин В12-фолиево-дефицитной анемии, при полицитемии, а также у новорожденных. Наличие ретикулоцитоза позволяет заподозрить скрытое кровотечение. Снижение количества ретикулоцитов или их полное отсутствие отмечается при арегенераторных гипо-апластических анемиях, а также при не леченой витамин В12-фолиево-дефицитной анемии.

Лейкоцитарная формула:

Лейкоцитарной формулой называют процентное соотношение отдельных форм лейкоцитов, которые считают в окрашенных мазках крови в пересчете на 100 лейкоцитов и выражают в виде процентного содержания каждого вида белых кровяных клеток. Помимо количественной характеристики лейкоцитарной формулы необходимо проводить качественную оценку морфологического состава кровяных клеток, поскольку это позволяет установить факт наличия у больного патологии кроветворной системы, конкретизировать клинический вариант патологического процесса, степень его выраженности, эффективность лечения (в динамике) и прогноз.

Лейкоциты:

Лейкоциты периферической крови делятся на гранулоциты (клетки, в протоплазме которых имеется зернистость) - базофилы, эозинофилы, нейтрофилы палочкоядерные и сегментарные и агранулоциты (клетки, в протоплазме которых зернистость отсутствует) - лимфоциты и моноциты.

Расшифровка лейкоцитов и норма:

Увеличение или уменьшение количества отдельных видов лейкоцитов может быть абсолютным и относительным. Изменение процентного содержания не всегда соответствует колебанию абсолютных величин, что необходимо принимать во внимание при анализе лейкоцитарной формулы крови.

В крови взрослого человека в норме насчитывают от 4 до 8 х 10 9/л лейкоцитов. Уменьшение числа лейкоцитов (лейкопения) встречается при очень тяжелых инфекционных заболеваниях и токсических состояниях: грипп и многие другие вирусные заболевания, брюшной тиф, дистрофия, голодание, анафилаксия, гиперспленизм, при применении некоторых лекарственных препаратов (сульфаниламиды, бутадион, левомицетин, цитостатики, иммунодепресеанты), токсических веществ (бензол, мышьяк), при лучевой болезни. Отчетливо выражена лейкопения при нейтропениях различного генеза, гипо- и апластической анемиях, а также некоторых заболеваниях эндокринной системы: болезнь Аддисона, болезнь Симмондса.

Увеличение количества лейкоцитов более 8 х 10 9/л называют лейкоцитозом, который, в свою очередь, может быть абсолютным и относительным. Относительный лейкоцитоз возникает вследствие поступления лейкоцитов в ток крови из органов, служащих для них депо. Наблюдается это после приема пищи (пищеварительный лейкоцитоз), интенсивной мышечной нагрузки (миогенный лейкоцитоз), горячих и холодных ванн, сильных эмоций (вегетососудистый лейкоцитоз).

Абсолютный лейкоцитоз может быть обусловлен гиперплазией кроветворной ткани, что наблюдается при лейкозах, а также является временной реакцией крови на воспалительный процесс в организме (пневмония, плеврит, воспалительные заболевания со стороны желчного пузыря и протоков, перитонит, гнойный абсцесс, сепсис, рожа, ангины, инфекционные заболевания бактериального происхождения). Кроме этого, лейкоцитоз может возникать вследствие воздействия экзогенных токсических веществ (угарный газ, нитробензол и др.).

Количество базофилов, норма:

Количество базофилов в периферической крови в норме невелико и колеблется от 0 до 1%.

Расшифровка:

Увеличение количества базофилов наблюдается при диабете, нефрозе, микседеме, в острой стадии аутоиммунной тромбоцитопении, при хроническом миелолейкозе, миелофиброзе. У большинства больных параллельно с увеличением концентрации базофилов прослеживается высокий уровень гистамина в крови и моче. Снижение количества базофилов отмечается при введении кортикостероидов, адреналина, при гипертиреозе и любой стрессовой ситуации.

Количество эозинофилов, норма:

У здоровых взрослых людей в периферической крови содержится от 0 до 5% эозинофилов. У ребенка в норме в крови содержание эозинофилов колеблется от 1 до 4%.

Расшифровка:

Увеличение числа эозинофилов (эозинофилия) наблюдается при гельминтозах (аскаридоз, энтеробиоз, анкилостомидоз, трихинеллез), лямблиозе, лимфогранулематозе, хроническом миелолейкозе, эозинофильной гранулеме, аллергических состояниях (бронхиальная астма, крапивница, сенная лихорадка, пищевая и лекарственная аллергия).

Снижение количества эозинофилов (эозинопения) или полное отсутствие (анэозинофилия) наблюдается в начальном периоде острых инфекционных и воспалительных процессов, инфаркта миокарда. Появление в этих случаях эозинофилов в крови является хорошим прогностическим признаком «эозинофильная заря выздоровления».

Палочко-ядерные и сегментоядерные нейтрофилы, норма:

В норме в периферической крови обнаруживаются палочко-ядерные и сегментоядерные нейтрофилы. У здоровых людей содержится от 1 до 6% палочкоядерных нейтрофилов и от 45 до 70% сегментоядерных.

Расшифровка:

В патологических условиях в периферической крови могут появляться нейтрофилы с круглым ядром, так называемые юные нейтрофилы, либо их предшественники - миелоциты, что обозначается как сдвиг лейкоцитарной формулы влево. Сдвигом лейкоцитарной формулы вправо называется увеличение более зрелых нейтрофилов, то есть сегментоядерных.

Моноциты, норма:

У здоровых людей количество моноцитов в периферической крови составляет 2-9%.

Расшифровка:

При различных патологических состояниях отмечается также уменьшение или увеличение числа моноцитов. В большинстве случаев моноцитоз свидетельствует развитии патоиммунных реакций в организме. Моноцитоз в сочетании с нейтрофилезом наблюдается при затяжном септическом эндокардите, гнойно-воспалительных процессах в организме, при туберкулезе. Абсолютный моноцитоз развивается как специфическая реакция на вирус Эпштейн-Барра и характерен для инфекционного мононуклеоза. Моноцитопения характерна для тяжелых септических заболеваний и гипертоксических форм инфекционных процессов.

Лимфоциты, норма:

Количество лимфоцитов в норме в периферической крови составляет 18-40%.

Расшифровка лимфоцитов:

Увеличение количества лимфоцитов (лимфоцитоз) часто встречается при заболеваниях, сопровождающихся нейтропенией, и является относительным. Абсолютный лимфоцитоз встречается при инфекционном мононуклеозе, хроническом лимфолейкозе, туберкулезе и некоторых инфекционных болезнях (корь, краснуха, ветряная оспа, коклюш). Лимфопения нередко встречается у больных с нейтрофилезом, то есть является относительной.

Абсолютная лимфоцитопения наблюдается при всех заболеваниях, сопровождающихся замещением лимфоидной ткани другими клеточными элементами (лимфогранулематоз, лимфосаркома, острый и хронический миелоидный лейкоз), а также при уремии, тяжелых септических состояниях, распространенном и прогрессирующем туберкулезе, лучевой болезни, длительном применении гормонов.

Изменения морфологического состава периферической крови:

Помимо количественной оценки лейкоцитарной формулы микроскопическое исследование мазков крови позволяет установить качественные изменения морфологического состава периферической крови.

Расшифровка:

Наиболее значительными эти изменения бывают при лейкозах. У больных с острым лейкозом общее количество лейкоцитов может быть сниженным, нормальным или повышенным. Качественный состав периферической крови при этом характеризуется наличием незрелых анаплазированных родоначальных клеток кроветворения - бластов (лимфобластов, монобластов, миелобластов, эритробластов, плазмобластов, мегакариобластов и морфологически не распознаваемых полипотентных и унипотентных клеток-предшественниц.

Нередко периферическая кровь на 90-95% состоит из бластных клеток и только на 5-10% из зрелых лейкоцитов. Разрыв в гемограмме между бластными клетками и зрелыми очень характерен для острого лейкоза и обозначается как лейкемическое зияние, лейкемический провал (hiatus leucemicus). В зависимости от преобладания того или иного вида бластных клеток выделяют соответствующие формы лейкоза: лимфобластный, миелобластный, миеломонобластный, плазмобластный, мегакариобластный, эритролейкоз, эритромиелоз.

При остром лейкозе морфологические изменения касаются не только белой крови, выявляются изменения, касающиеся красной крови в виде анемии (происходит угнетение красного ростка кроветворения, нарушение созревания тромбоцитов). При хроническом лейкозе морфологические изменения периферической крови в основном определяются формой лейкоза, стадией развития патологического процесса, его остротой. Наиболее часто встречаются хронический миелолейкоз и лимфолейкозы. Морфологические изменения периферической крови при хроническом миелолейкозе характеризуются увеличением количества Лейкоцитов за счет выраженного сдвига лейкоцитарной формулы влево вплоть до миелоцитов и промиелоцитов. Нередко при этом в периферической крови повышается количество базофилов и эзинофилов различной степени зрелости (базофильно-эозинофильная ассоциация).

Определенную гематологическую характеристику остроты и степени выраженности хронического миелолейкоза дает сопоставление процентного соотношения зрелых и незрелых нейтрофилов. Небольшое количество миелобластов, промиелоцитов, миелоцитов и метамиелоцитов (незрелых форм) в пределах 10-15% может свидетельствовать о доброкачественном течении лейкемического процесса. При обострении хронического миелолейкоза в периферической крови увеличивается количество бластных клеток, что обозначается как бластный криз. Количество тромбоцитов при хроническом миелолейкозе в ранних стадиях заболевания бывает повышенным или нормальным, а в конечной стадии уже сниженным. Анемия не характерна для начальных стадий хронического миелолейкоза, а появляется только в развернутой стадии и прогрессивно нарастает в терминальной.

При хроническом лимфолейкозе морфологические изменения лейкоцитарной формулы представлены в виде лейкоцитоза, главным образом за счет лимфоцитов, количество которых может доходить до 80-90%, причем лимфоциты обычно малого размера. Большинство клеток представлено зрелыми элементами. При относительно доброкачественном течении заболевания количество незрелых лимфоидных клеток (пролимфоцитов, лимфобластов) составляет около 5-10%. Увеличение количества этих клеток указывает на обострение патологического процесса.

Показатели гемограммы при хроническом моноцитарном лейкозе характеризуются увеличением количества моноцитов до 30-40% на фоне выраженного лейкоцитоза до 15000-30 000.

Эритремия (болезнь Вакеза) характеризуется изменениями в гемограмме в виде эритроцитоза, лейкоцитоза, тромбоцитоза, повышением концентрации гемоглобина до 160-200 г/л на фоне уменьшения СОЭ до 1-2 мм/ч.

Тромбоциты, норма:

Количество тромбоцитов в норме колеблется от 180 х 10 9/л до 320х10 9/л.

Расшифровка тромбоцитов:

Уменьшение количества тромбоцитов (тромбоцитопения) имеет место при болезни Верльгофа, лейкозах, отравлении бензолом, анилином. Увеличение количества тромбоцитов (тромбоцитоз) отмечается при кровопотерях, после спленэктомии и при некоторых формах злокачественных новообразований.

Плазматические клетки:

Плазматические клетки в норме практически не встречаются.

Расшифровка:

Увеличение числа плазматических клеток наблюдается при всех заболеваниях, сопровождающихся напряжением лимфоидного аппарата, в частности при инфекционном мононуклеозе. Также имеет место при таких инфекционных заболеваниях, как корь, краснуха, ветряная оспа, скарлатина, серозные менингиты.

Волчаночные клетки:

Волчаночные клетки (L Е-клетки) образуются в результате фагоцитоза нейтрофильными лейкоцитами, реже моноцитами ядер клеток, содержащих ДНК. У здоровых людей волчаночные клетки отсутствуют.

Расшифровка:

Обнаружение L Е-клеток является специфическим симптомом системной красной волчанки. Однако получение отрицательного результата не исключает данного заболевания, так как это бывает в раннем периоде заболевания. WBC (white blood cells) - количество лейкоцитов крови (х10 9 /л). Измерение числа лейкоцитов проводится после полного лизиса эритроцитов специальным реактивом. Все частицы размером более 35 фл считаются как лейкоциты. Тромбоциты, размер которых меньше порогового значения 35 фл, исключаются из подсчета. Коэффициент вариации (CV) при автоматическом определении этого показателя составляет 2-3%.

При наличии резистентных к лизису эритроцитов они определяются как лейкоциты и вызывают повышение числа WBC. В этих случаях следует обратить внимание на изменение формы RBC гистограммы.

Таблица 11. Возможные ошибки измерения лейкоцитов

6.4. Подсчет лейкоцитарной формулы

Многие современные гематологические анализаторы определяют от 6 до 10 показателей лейкоцитарной формулы с учетом относительного и абсолютного количества клеток, так называемые 3Diff или 5Diff .

6.4.1 Гематологические анализаторы, определяющие 18 параметров крови, дифференцируют все WBC на три популяции (3Diff). В основе работы анализаторов 3Diff лежит принцип кондуктометрии. Клетки дифференцируются по объему на 3 категории: лимфоциты, нейтрофилы и средние клетки, состоящие преимущественно из моноцитов с добавлением эозинофилов и базофилов. Определяется как относительное (%), так и абсолютное их содержание (клетки/л).

Автоматические гематологические анализаторы, определяющие 26 и более параметров крови, дифференцируют WBC на пять популяций (5Diff). В основе работы анализаторов 5Diff используется комбинация кондуктометрического метода с другими технологиями, такими как: метод лазерного светорассеивания, радиочастотный анализ, использование дифференцирующих лизатов, цитохимический метод.

Автоматический дифференцированный счет лейкоцитов должен выполняться в день взятия крови. Для получения наиболее точных результатов дифференциального анализа лейкоцитов рекомендуется исследование образцов крови проводить в промежуток времени от 30 минут до 5 часов после взятия материала, при значительном лейкоцитозе после предварительного разведения крови – от 5 минут до 1 часа.

После 24-часового интервала изменения, возникшие при хранении, могут воздействовать на систему «сигналы тревоги» и искажать результат. На дифференциальный счет популяций лейкоцитов влияют те же факторы, что и на общее число лейкоцитов. Появление «сигналов тревоги» указывает на наличие патологических изменений в исследуемом образце и требует микроскопического исследования окрашенного мазка крови.

6.4.2 Некоторые факторы, влияющие на дифференциальный счет лейкоцитов в гематологических анализаторах 3Diff

LY и LY%: микроформы бластов, нормобласты, резистентные к лизису эритроциты (например, эритроциты, содержащие малярийный плазмодий) могут быть причиной ошибочного измерения числа LY.

MO и MO%: крупные лимфоциты, атипичные лимфоциты, плазматические клетки, бластные клетки и избыточное количество базофилов могут оказывать влияние на точность подсчета МО. Часть эозинофилов также может просчитываться в данном канале.

GR и GR%: избыток эозинофилов, метамиелоцитов, промиелоцитов, бластных клеток и плазматических клеток могут быть причиной ошибочного подсчета GR и GR%.

На лейкоцитарной гистограмме в анализаторах 3Diff субпопуляции лейкоцитов попадают в три главные области гистограммы распределения WBC, которые отделены с помощью пороговых значений (дискриминаторов). Если результаты подсчета попадают в область нормальных значений, то никаких маркеров, предупреждающих о возможной патологии не появляется. Форма гистограммы изменяется при нарушении распределения лейкоцитов по популяциям или недостаточном лизисе эритроцитов.

Таким образом, гематологические анализаторы 3Diff в большинстве случаев позволяют выявлять изменения лейкоцитарной формулы крови, однако не способны проводить полную дифференцировку лейкоцитов. При наличии микроформ бластных клеток, по своему размеру сходных с лимфоцитами, анализаторы, принцип измерения которых основан только на кондуктометрическом методе, будут относить их к популяции мелких клеток (лимфоцитов).

6.4.3 В гематологических анализаторах 5Diff подсчитываются все 5 классов лейкоцитов, встречающихся в норме: нейтрофилы, лимфоциты, моноциты, эозинофилы и базофилы. Использование одновременно нескольких методов анализа позволяет значительно улучшить качество дифференцировки клеток и, следовательно, работу анализатора. В анализаторах данного типа более сложная система «сигналов тревоги», позволяющая уточнить наличие патологических клеток (незрелых нейтрофилов, атипичных лимфоцитов, бластных клеток, нормобластов). При плохом качестве материала анализаторы выдают дополнительные «сигналы тревоги», такие, например, как сгустки тромбоцитов, фрагменты эритроцитов-призраков. Они снабжены соответствующими программами обнаружения незрелых клеток, активированных лимфоцитов, бластных клеток.

Обозначения флагов дифференциальных параметров зависят от фирмы-производителя анализатора.

Это могут быть: LIC (Large Immature Cells), которые, в свою очередь, подразделяются на:

IMG (Immature Granulocytes), незрелые гранулоциты,

IMM (Immature Monocytes) незрелые моноциты,

IML (Immature Lymphocytes) незрелые лимфоциты,

LS (Left Shift) – левый сдвиг, указывающий на возможность левого сдвига в формуле крови (палочкоядерные нейтрофилы)

исследование мазка крови.

При лимфоцитозах или наличии измененных по объему лимфоцитов появляются следующие флаги:

Аtipical Lymphocytes, Variant

Lymphocytes, Reactive

Lymphocytes, Abnormal Lymphocytes

Большинство гематологических анализаторов 5Diff имеют жесткую систему как внутреннего, так и внешнего контроля качества, что делает их работу более надежной.

Несмотря на все достоинства, даже самые современные гематологические анализаторы обладают некоторыми ограничениями, которые касаются точной морфологической оценки патологических клеток (например, при лейкозах), и не в состоянии полностью заменить световую микроскопию.

1. 
   Контроль качества исследования клеточного состава крови на автоматических гематологических анализаторах
   1. 
      Порядок проведения контроля качества

Комплексная система контроля качества клинических лабораторных исследований осуществляется путем:

Установления единых требований к аналитическому качеству количественных методов;

Ежесерийного выполнения процедур внутрилабораторного контроля качества с использованием контрольных материалов (оперативный контроль качества);

Регулярного участия в программах внешней оценки качества (ГОСТ Р 53133.1―2008) .

Внутрилабораторный контроль качества представляет собой систему повседневного слежения за точностью получаемых на гематологическом анализаторе результатов для поддержания стабильности аналитической системы, выявления и устранения недопустимых случайных и систематических погрешностей и заключается в сопоставлении результатов исследования проб с результатами исследования контрольного материала и измерении величины отклонения.

Проводится в соответствии с инструкцией к прибору и инструкцией к используемым контрольным материалам и требованиями стандарта ГОСТ Р 53133.2―2008 ..

Внутрилабораторный контроль качества должен быть:

Систематическим, повседневным, проводиться по единым правилам, т.е. анализ контрольных проб должен включаться в обычный ход работы лаборатории;

Охватывать все области измерений (норма, высокие и низкие патологические значения);

Производиться в реальных условиях работы лаборатории (так же, как обычные пробы пациентов, т.е. тем же персоналом и в тех же условиях);

Объективным (желательно "шифровать" контрольный материал, чтобы исполнитель не знал, где опыт, а где контроль).

Принцип проведения внутреннего контроля достаточно прост: периодически (в каждой серии) нужно проводить измерение одного и того же контрольного материала, а результаты этих измерений заносить на контрольную карту.

Хорошо организованная система внутреннего контроля качества позволяет достаточно эффективно выявлять ошибки, связанные с:

• 
  внешними варьирующими факторами (реактивы, калибраторы, расходные материалы);

• 
  внутренними варьирующими факторами (организация в лаборатории "домашних реактивов", обучение персонала, обслуживание приборов, ведение документации, реакция персонала на возникающие проблемы).

Концентрация гемоглобина в большинстве гематологических анализаторов определяется фотометрически. Различное влияние липидемии на определение гемоглобина связано с техническими особенностями прибора. Величина результирующей ошибки зависит от оптической геометрии прибора: размера выходного отверстия из кюветы для образцов и расстояния до фотодиода.

Контролем за правильностью измерения концентрации гемоглобина может служить величина МСНС.Чаще всего увеличение МСНС свидетельствует об ошибках, допущенных при измерении пробы (погрешности определения гемоглобина или MCV). В подобных ситуациях наиболее точные результаты определения концентрации гемоглобина гемиглобинцианидным методом могут быть получены на фотометре при добавлении в холостую пробу 20 мкл сыворотки больного. Таким образом, данный параметр может быть использован и как индикатор ошибок, допущенных на аналитическом или преаналитическом этапах работы.

1. 
   Требования к качеству исследований клеточного состава крови

Для оценки качества исследований рассчитываются следующие статистические

показатели:

Среднее арифметическое значение или средняя арифметическая (Х):
- предварительная оценка прецизионности (по 10 измерениям в одной серии) - CV 10 ;

Предварительная оценка относительного смещения – В 10 ;

Окончательная оценка прецизионности (по 20 измерениям) CV 20 ;

Окончательная оценка относительного смещения В 20 .

В таблице 11 представлены рекомендуемые стандартом ГОСТ Р 53133.1─2008 (приложение А) внутрилабораторных погрешностей гематологических исследований. Эти ПДЗ вычислены как компромисс между основанными на коэффициентах биологической вариации пределами погрешностей и фактическими характеристиками точности, достигнутыми большей частью клинико-диагностических лабораторий страны по данным системы внешней оценки качества.

Таблица 12

Оперативные пределы допускаемых значений

Вид исследования
	В 10	CV 10	B 20	CV 20	B 1
Общий гемоглобин в крови	± 5	4	± 4	4	± 9
Эритроциты в крови	± 7	4	± 6	4	± 11

В таблице 13 представлены ПДЗ, рассчитанные на основе имеющихся в литературе данных о биологической вариации. Их можно рассматривать как желательные нормативы.

Таблица 13

Оперативные пределы допускаемых значений, рассчитанные на основе данных о биологической вариации

Вид исследования	Оперативные пределы допускаемых значений
	для установочной серии внутрилабораторного контроля качества, коэффициент вариации, %				для результата единичного измерения, относительное смещение, %
	В 10	CV 10	B 20	CV 20	B 1
Эритроциты, подсчет в крови	± 2,7	2,2	± 2,4	2,0	± 4,9
Эритроциты, средний объем клетки	± 1,6	0,9	± 1,5	0,8	± 2,5
Гемоглобин, концентрация в крови	± 2,7	1,9	± 2,4	1,8	± 4,5
Гемоглобин, средняя концентрация в эритроците (МСНС)	± 1,3	1,2	± 1,2	1,1	± 2,5
Гемоглобин, среднее содержание в одном эритроците (МСН)	± 1,9	1,1	± 1,7	1,0	± 2,9
Гематокрит	± 2,6	1,9	± 2,4	1,8	± 4,5
Лейкоциты, подсчет в крови	± 9,0	7,5	± 8,0	6,9	± 16,3
Лимфоциты, подсчет в крови	± 10,6	7,1	± 9,7	6,5	± 17,6
Моноциты, подсчет в крови	± 18,7	12,2	± 17,1	11,2	± 30,7
Нейтрофилы, подсчет в крови	± 14,1	11,0	± 12,7	10,1	± 24,9
Тромбоциты, подсчет в крови	± 8,7	6,2	± 7,9	5,7	± 14,8
Тромбоциты, средний объем	± 3,6	2,9	± 3,2	2,7	± 6,5
Ретикулоциты, подсчет в крови	± 11,2	7,5	± 10,2	6,9	± 18,5

II. ВОССТАНОВЛЕНИЕ / ОПТИМИЗАЦИЯ КИСЛОРОДТРАНСПОРТНОЙ ФУНКЦИИ КРОВИ

А - ламинарное движение крови в норме; турбулентный ток крови при сужении (б), расширении (в) просвета сосуда, появление преграды на пути кровотока (г)

А знаете ли Вы, зачем нужен анализ крови на триглицериды?

Изучение мазка периферической крови остается важной частью гематологического исследования. Клиницисту следует учесть, что к изучению мазка имеет смысл приступать после получения результатов автоматизированного анализа крови. Время, затрачиваемое на изучение мазка, необходимо для получения дополнительной информации, а не для дублирования данных автоматизированного анализа. В целом автоматизированный анализ крови гораздо эффективнее ручных методов при определении средних величин и обычных количественных характеристик: эритроцитарных индексов, количества клеток, размеров тромбоцитов и процентного соотношения лимфоцитов и гранулоцитов. Однако автоматизированный анализатор в лучшем случае малонадежен, а часто совершенно непригоден для выявления редких аномалий: ядросодержащих клеток эритроидного ряда, незрелых гранулоцитов, фрагментов эритроцитов.

Эритроциты

Обнаружение эритроцитов в виде монетных столбиков может быть первым толчком к выявлению лимфоцитарных или плазмоцитарных нарушений. Фрагменты эритроцитов удаётся обнаружить, если они составляют не менее 0,5% всех клеток. Примерно при таком же уровне их содержания отклонения выявляются и на эритроцитарной гистограмме. Таким образом, оба метода дополняют друг друга. Аномалии формы могут указывать на конкретные заболевания, например, серповидные гемоглобинопатии, тогда как «каплевидные» клетки свидетельствуют об инфильтрации костного мозга опухолью или о миелофиброзе. Мишеневидные эритроциты и эритроциты в виде точильного камня являются менее специфическими аномалиями. Наиболее частая морфологическая аномалия описывается как «умеренный анизоцитоз, умеренный пойкилоцитоз». К сожалению, эта аномалия настолько неспецифична, что ее обнаружение бесполезно даже для решения вопроса о наличии гематологического заболевания.

Полихромазию необходимо оценивать количественно, клиницисты должны знать, что различная выраженность полихромазии указывает на различную степень стимуляции костного мозга. Базофильная зернистость является еще одним свидетельством присутствия остаточных количеств РНК; она может встречаться при любой форме стимуляции эритроидного ростка. Следует внимательно искать ядросодержащие эритроциты, поскольку их присутствие указывает на выраженную стимуляцию эритроидного ростка, недостаточность функции селезенки или инфильтрацию костного мозга опухолевыми клетками.

Тромбоциты

Исследовать тромбоциты необходимо для подтверждения того, что их количество соответствует результатам автоматизированного подсчета (каждый тромбоцит в поле зрения при большом увеличении соответствует их содержанию в крови приблизительно на уровне 15·10 9 /л). Выраженное слипание тромбоцитов может обусловить ошибочно низкие результаты их подсчета. При значительном тромбоцитозе показатель СОТ обычно низок, в этом случае в мазке будут выделяться присутствующие в относительно небольшом количестве наиболее крупные тромбоциты. Если с помощью автоанализатора не удалось подсчитать число тромбоцитов и определить СОТ из-за контаминации пробы или артефакта, особенно важно исследовать мазок, чтобы определить наличие тромбоцитов, их приблизительное число и вероятную причину артефакта. Чаще всего погрешности при автоматизированном подсчете тромбоцитов возникают из-за присутствия в пробе фрагментов эритроцитов или лейкоцитов .

Лейкоциты

Следует обратить внимание на редко встречающиеся клетки: моноциты, эозинофилы, базофилы, а также проверить, нет ли отсутствующих в норме клеток: миелоцитов, плазмоцитов, бластов. Кроме того, следует поискать морфологические аномалии. Аномалия Пельгера-Хюэта (врожденная гипосегментация гранулоцитов) и псевдоаномалия Пельгера-Хюэта (приобретенная гипосегментация гранулоцитов при миелопролиферативном заболевании) встречаются редко, но их следует отличать от расширения перемычек между фрагментами ядра. Гиперсегментация нейтрофилов указывает на мегалобластную анемию, почечную недостаточность или тепловой удар. Часто встречается токсическая зернистость, причину которой не всегда удается установить. Наконец, клиницист должен знать, что в подавляющем большинстве случаев мазок периферической крови должен исследовать только один опытный специалист. Если мазок описан квалифицированным лаборантом или консультантом, вряд ли к его заключению удастся многое добавить при повторном исследовании препарата другим специалистом .

Клинический анализ крови означает подсчет количества клеток в образце венозной крови. Капиллярная кровь не является рекомендуемой средой исследования для подсчета клеток, однако исследование гемограммы часто выполняют из образца капиллярной крови в отделениях интенсивной терапии.

Определение лейкоцитарной формулы, исследование среднего размера эритроцитов, тромбоцитов, определение количества предшественников эритроцитов (ретикулоцитов) и степени их зрелости, оценка скорости оседания эритроцитов и т.д., все это входит в понятие «клинический анализ крови».

Клинический анализ крови выполняется как первое скрининговое исследование при обращении и жалобах пациента на недомогание. Может быть выполнен сокращенный клинический анализ крови, так называемая «тройка» – подсчет количества эритроцитов, лейкоцитов и определение скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Сокращенный клинический анализ крови малоинформативен, т.к. может охарактеризовать только выраженные патологические процессы.

Более целесообразно из того же объема образца крови выполнить развернутую гемограмму: подсчет количества эритроцитов с оценкой их среднего размера (MCV), подсчет общего количества лейкоцитов и оценку лейкоцитарной формулы (подсчет нейтрофилов, базофилов, эозинофилов, моноцитов, лимфоцитов), подсчет количества тромбоцитов и оценку среднего размера тромбоцита (MPV), ретикулоцитов и их среднего размера (MRV), степени зрелости ретикулоцитов (IRF).

Многочисленные характеристики клеток в настоящее время могут быть получены в автоматическом режиме в течение 3-5 минут после взятия крови. На основании развернутого исследования гемограммы может быть сделано не только заключение о наличии воспалительной реакции, анемии, но и характере других патологических процессов, возможной перенесенной или продолжающейся кровопотере, дефиците не только железа, но и витамина В12, фолиевой кислоты.

Показания к исследованию

• Скрининговое обследование при профилактическом осмотре, диспансеризации;
• первичное обследование при госпитализации;
• диагностика анемий;
• диагностика болезней системы кроветворения;
• инфекционные заболевания;
• воспалительные процессы;
• гемато-онкологические заболевания;
• контроль эффективности терапии.

Метод исследования

Метод исследования зависит от требуемых параметров гемограммы.

В ручном режиме, из образца крови (3–5 мл) часть отбирается в капилляр для определения СОЭ, часть образца крови используется для определения гемоглобина, капля крови – для приготовления мазка и дальнейшего подсчета лейкоцитарной формулы. Отдельное количество крови требуется для приготовления мазка и подсчета тромбоцитов, а также часть образца крови необходима для исследования количества эритроцитов и отдельно – ретикулоцитов. В ручном режиме, при необходимости окраски и визуальной оценки мазка, результат развернутой гемограммы пациента в многокоечном стационаре, может быть получен в конце рабочего дня или позднее.

В условиях автоматизированного подсчета клеток и оценки различных популяций требуется от 150 до 300 мкл крови и 100 мкл для определения СОЭ. Исследование в автоматическом режиме основано на импедансном методе Культера (1956), в основе которого лежит принцип замыкания электрической цепи каждой клеткой, последовательно проходящей через апертуру пробоотборника. В последующем метод автоматизированного подсчета получил ряд усовершенствований, в современных анализаторах каждая клетка оценивается по нескольким параметрам: проводимости, светорассеиванию, размеру, наличию на поверхности CD-маркеров, соответственно, принадлежности к различным популяциям. Количество параметров определяется моделью прибора.

Исследование в автоматическом режиме позволяет выявить патологические образцы, которые должны быть пересмотрены визуально специалистом лабораторной диагностики. Визуальный контроль гемограммы предполагает приготовления мазка крови, слайда, что может быть выполнено из капли крови уже взятого образца как в ручном, так и автоматическом режиме. Автоматизированное приготовление мазка крови предпочтительно, т.к. происходит равномерное распределение капли крови и стандартизированное окрашивание. Визуальная микроскопия мазка проводится в пяти полях зрения.

Исследование крови в автоматическом режиме занимает 3–5 минут, если не требуется дополнительное приготовление мазка и исследование СОЭ.

Условия взятия и хранения образца

Клинический анализ крови выполняется из венозной крови, стабилизированной калиевой солью ЭДТА, если не указано иначе в инструкции к анализатору. Взятие крови выполняется натощак. Образец крови должен быть немедленно после взятия перемешан 9 раз осторожным переворачиванием, следует избегать образования пены и резкого встряхивания. До исследования образец крови может храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 часов в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.

При использовании образца капиллярной крови для клинического анализа необходимо получить свободнотекущие капли капиллярной крови из предварительно прогретой области прокола. Сбор капиллярной крови без сдавливания пальца обеспечивает сохранность клеток. Надавливание области прокола и сбор образца из охлажденной конечности приведут к искажению результатов гемограммы. Образцы капиллярной крови должны быть стабилизированы калиевой солью ЭДТА, поэтому для взятия образца следует использовать капилляры, обработанные K3ЭДТА. Образцы могут храниться при комнатной температуре (23–24 °С) в течение 24 ч в штативе, в вертикальном положении, в удаленном от света месте.

Микроскопия мазка крови – исследование под микроскопом препарата, приготовленного из капли крови.

Выполнение микроскопии мазка крови является опциональной частью общего анализа крови или лейкоцитарной формулы и отдельно не производится.

Синонимы русские

Микроскопическое исследование мазка крови, мазок крови, микроскопия крови, ручной подсчет лейкоцитарной формулы, мазок периферической крови.

Синонимы английские

Blood Smear, Peripheral smear, Manual differential, Red blood cell morphology, White Blood cell morphology, Peripheral blood smear, Blood Film Examination, Blood Film

Для чего используется этот анализ?

• Чтобы определить нарушения формы и размера, а также изменения количества эритроцитов, лейкоцитов и тромбоцитов, различные типы лейкоцитов (включая незрелые формы) и их процентное соотношение.
• Для диагонстики различных заболеваний, которые связаны с нарушениями образования, функции или с избыточным разрушением форменных элементов крови.
• Чтобы отслеживать образование клеток крови и степень их зрелости при лейкозах, после химио- или лучевой терапии, а также при нарушениях образования гемоглобина.

• Когда по результатам общего анализа крови и лейкоцитарной формулы, назначаемым по самому широкому кругу показаний, выявлено значительное увеличение количества лейкоцитов, атипичные или незрелые клетки.
• При подозрении на заболевание, влияющее на клетки крови.
• При приеме лекарств, которые могут влиять на производство клеток крови.

Какой биоматериал можно использовать для анализа?

Венозную или капиллярную кровь.

Общая информация об исследовании

Исследование позволяет морфологически оценить клетки (форменные элементы) крови (эритроциты, лейкоциты, тромбоциты), а также выполнить их подсчет. Клетки крови образуются и созревают в красном костном мозге и затем выбрасываются в общий кровоток. У каждой разновидности клеток свои функции: лейкоциты отвечают за борьбу с инфекционными агентами, эритроциты – обеспечивают доставку кислорода в ткани и удаление из них углекислого газа, тромбоциты являются важнейшим звеном системы гемостаза. В физиологических условиях количество и морфологические признаки клеток крови стабильны и не выходят за рамки референсных значений. При различных заболеваниях количество и свойства (форма, объем, цвет, наличие включений, их количество и пр.) закономерно изменяется. По этой причине оценка клеточных элементов в мазке крови является универсальным тестом при диагностике многих патологических состояний и широко применяется в практике врача практически любой специализации.

Мазок периферической крови – это «моментальный снимок» клеток крови в том виде, в каком они находятся в момент взятия образца. Для выполнения исследования венозную или капиллярную кровь помещают на предметное стекло, которое должно быть тщательно обезжирено. Затем другое стекло ставят на предметное стекло под углом 45" и проводят вдоль капли крови так, чтобы она растеклась тонким слоем по ширине шлифованного стекла. Затем мазок фиксируют, чтобы форменные элементы крови были более устойчивы. После этого мазок окрашивают специальным красителем, который делает клетки и их элементы более яркими, и высушивают. После чего врач в лаборатории изучает мазок под микроскопом.

Врач может определить различные типы лейкоцитов (эозинофилы, нейтрофилы, лимфоциты, базофилы, моноциты), их незрелые формы, а также процентное содержание каждого из типов этих клеток, посмотрев больше 100 клеток.

По цвету эритроцитов можно судить о содержании в нем гемоглобина.

Эритроциты

Нормальные зрелые эритроциты имеют одинаковый размер – около 7,5 мкм. Это безъядерные клетки в виде пончика (двояковогнутые диски). Такая форма увеличивает площадь поверхности газообмена, что способствуют выполняемой им функции – переносу кислорода от легких к тканям и двуокиси углерода (СО2) обратно в легкие путем связывания их с гемоглобином. Кроме того, эта форма позволяет эритроцитам деформироваться и проходить через узкие кровеносные сосуды – капилляры (диаметром до 2-3 мкм). Благодаря наличию гемоглобина при обычной окраске эритроциты имеют красный цвет, менее яркий в центре клетки.

Продолжительность жизни эритроцита в норме около 120 дней.

Не все эритроциты в кровяном русле имеют одинаковую форму и размер, однако значительное количество измененных клеток свидетельствует о какой-то патологии.

Нейтрофилы

При окраске по Романовскому нейтрофилы выглядят как светлые клетки, содержащие маленькие розово-фиолетовые гранулы. Поэтому их еще называют гранулоцитами. Эти гранулы содержат определенные ферменты и белки, способные нейтрализовывать и уничтожать микроорганизмы. Нормальные зрелые нейтрофилы имеют ядра с 4-5 долями или сегментами, поэтому называются сегментоядерными нейтрофилами.

Для чего используется исследование?

Пока не появились автоматические анализаторы, каждый раз, когда выполнялся общий анализ крови, проводилось микроскопическое исследование мазка крови, так как определить процентное соотношение различных форм лейкоцитов (лейкоцитарную формулу) по-другому было нельзя. В современных анализаторах подсчет лейкоцитарной формулы осуществляется автоматически. Однако при подозрении на наличие патологических форменных элементов крови микроскопия мазка крови опытным врачом по-прежнему является лучшим способом выявления и оценки атипичных и незрелых клеток.

Когда назначается исследование?

Существует достаточно широкий круг заболеваний и расстройств, при которых могут изменяться свойства клеток, циркулирующих в кровяном русле. В норме в кровь из костного мозга попадают только зрелые клетки, однако при ряде заболеваний, например при лейкозах, в кровь могут попадать незрелые клетки – бласты. При некоторых состояниях, например при массивной инфекции, в лейкоцитах могут появляться характерные примеси, сами клетки могут становиться атипичными, как при инфекционном мононуклеозе. При недостатке железа или витамина B12, при врожденных нарушениях синтеза гемоглобина могут изменяться свойства и внешний вид эритроцитов. Обнаружение в мазке таких патологических клеток в большом количестве позволяет заподозрить вызвавшее их заболевание и назначить дополнительное обследование.

Мазок крови может регулярно назначаться пациентам с онкологическими заболеваниями костного мозга, лимфоузлов для наблюдения за динамикой состояния и контроля за эффективностью лечения.

Что означают результаты?

Изменения в мазке крови не всегда позволяют поставить диагноз. Как правило, они указывает на наличие некоего заболевания, что предполагает дальнейшее обследование в целях постановки точного диагноза.

www.helix.ru

Микроскопия - это что такое?

Важность науки в жизни всего общества отрицать очень сложно. Учёные и их разработки дали обществу всё то, чем оно теперь пользуется с радостью и наслаждается. Разработки учёных в разных областях позволяют побеждать смертельные болезни, бороться с психическими расстройствами, создавать уникальную «умную» технику и даже роботов. Возможности науки поистине безграничны. Новые лица всегда приносят с собой новые идеи, которые становятся основой для будущих разработок. Однако множество разработок базируется на простых и проверенных методах.

Многие мудрецы прошлого говорили о том, что существует макро-, микромир. На том этапе развития люди не могли осознать всю глубину этих слов. Ведь макро- и микромир действительно существуют и очень тесно взаимодействуют. Крохотные изменения в структуре клетки могут быть вызваны глобальными изменениями в Солнечной системе. На сегодняшний день доказать или опровергнуть такую взаимосвязь очень сложно, но исследования мира бактерий и клеток говорят о том, что клетка – это маленькая Вселенная.

Микроскопия

Микроскопия – это научное исследование объектов при помощи микроскопа. В переводе с греческого это слово означает «маленький, небольшой». Микроскопия может подразделяться на несколько подвидов: оптическую, многофотонную, рентгеновскую, лазерную и электронную. Цель этого способа исследования заключается в увеличенном наблюдении за объектом и регистрацией замеченных изменений.

История микроскопа

В начале своего исторического развития микроскопы представляли собой оптические приборы, которые использовали лучи видимого света. Такие приборы были очень слабы для наблюдения и подходили только для простейших операций. Идея возникновения электронного микроскопа возникла в тот момент, когда учёные задумались о замене электромагнитного излучения на электронный пучок. Это событие стало опорной точкой для развития электронного микроскопа, который значительно расширил возможности наблюдения за объектом.

Методы микроскопии

Для того чтобы правильно и тщательно обследовать какой-либо объект, необходимо работать по определённому алгоритму. Подобные алгоритмы вырабатываются один раз и применяются годами. Для того чтобы изучать окружающий мир при помощи специальной техники, необходимо владеть особыми методами. Методы микроскопии – это совокупность различных алгоритмов, следуя которым, можно основательно и системно изучить конкретный объект микромира. Прохождение пучка света через микроскоп сопровождается некоторыми изменениями первоначальных характеристик, которые могут быть вызваны структурным строением предмета. Этот процесс может сопровождаться рядов оптических эффектов, таких как отражение, поглощение, преломление, дисперсия и т.д.

Методы световой микроскопии

Световая микроскопия – это система методов, которые используют различные оптические эффекты для достоверного отображения результатов. Видимые элементы и характер полученного изображения будут во многом зависеть от освещения. Всего насчитывается большое количество методов микроскопии: светлого поля, косого освещения, интерференционного контраста, тёмного поля, поляризационный метод, фазово-контрастная, ультрафиолетовая, люминесцентная, инфракрасная микроскопия, конфокальный микроскоп.

Все эти методы имеют определённые достоинства и недостатки. При работе с образцом выбирать тот или иной метод следует исходя из его адекватности в данной ситуации. Сильные и слабые стороны каждого метода не важны в целом, главное, чтобы метод был применим в заданных условиях.

Микроскопия и медицина

Применение микроскопии в медицине имеет огромный потенциал. На сегодняшний день благодаря микроскопам можно исследовать различные клетки организма человека для того, чтобы точно определять состояние здоровья. Клетки организма дают наиболее точный и достоверный результат, который до недавнего времени было невозможно получить, так как микроскопы не могли дать исчерпывающей информации.

Использование таких приборов очень перспективно, ведь методы лечения и диагностики могут разительно преобразиться и вовсе перейти на новый уровень. Исследование с помощью микроскопов известно и применяется длительное время, однако наука стоит на пороге того, чтобы лечить человека клетками. Это уникальная возможность, которая позволит отойти от привычных методов лечения и забыть о лекарствах. Клетка – самый мощный элемент организма. Говорить о том, какую пользу может принести пересадка больному человеку здоровых клеток, просто бессмысленно, ведь это очевидно.

Исследование мочи

Общий анализ мочи – это комплекс мероприятий, которые направлены на исследование свойств мочи и её физико-химического состава. Важными показателями при этом являются цвет, запах, реакция, прозрачность, плотность, а также содержание в моче различных веществ. Микроскопия осадка мочи позволяет определить наличие солей, клеточных элементов и цилиндров. Следует понимать, что моча - это конечный продукт деятельности почек, который может очень точно отображать состояние обменных процессов и крови в организме.

Анализ осадка мочи

Микроскопия мочи позволяет создать более полную картину при полном обследовании организма. Также мазок часто используют для обычной и дифференциальной диагностики болезней мочевыводящих путей и почек. Во время лечения микроскопию мочи могут назначать для того, чтобы получить оценку эффективности докторского вмешательства. Исследование мочи позволяет выявить конкретные или потенциальные проблемы в водно-электролитном балансе организма, также в процессе обмена веществ. Анализ мочи весьма эффективен при диагностике на болезни желудочно-кишечного тракта, а также при инфекционных и воспалительных процессах в организме. Иногда микроскопию мочи используются для того, чтобы следить за состоянием пациента в период терапевтического или хирургического лечения.

Исследование крови под микроскопом

Кровяные тельца формируются в красном костном мозге, а затем выбрасываются в кровоток. Каждая клетка крови выполняет свою определённую функцию. Лейкоциты нужны для борьбы с инфекционными клетками, эритроциты способствуют обогащению клеток кислородов и удалению из них углекислого газа, тромбоциты очень важны для гемостаза. В нормальных условиях тело человека вырабатывает нормативное значение всех клеток, которое не выходит за определённые рамки. При возникновении каких-либо осложнений или при болезни клетки крови могут менять свои размеры, форму, цвет и количество. Только благодаря точному микроскопическому исследованию можно определить состояние клеток и сделать соответствующие выводы.

Кровь – это живительная жидкость организма, которая обеспечивает обмен полезными веществами между всеми клетками. Микроскопия мазка крови – это исследование, которое производится под микроскопом. Исследуется препарат, приготовленный из одной капли крови. Эта процедура входит в общий анализ крови или лейкоцитарную формулу и отдельно не совершается.

Микроскопия мазка

Для чего нужен мазок крови? Микроскопия мазка крови даёт специалисту очень важные знания о состоянии здоровья человека. При помощи этого анализа можно определить количественное соотношение эритроцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, а также их формы и размер. Кроме того, клинический анализ крови позволяет определять количественное выражение незрелых лейкоцитов, что является очень важным моментом в ряде заболеваний. Также мазок крови позволяет качественно диагностировать заболевания, которые могут быть связаны с нарушениями функций крови, её образования, свёртываемостью, а также разрушением форменных элементов крови. Очень важной задачей микроскопического мазка на кровь является регулярное отслеживание состояния клеток крови, их зрелость после лучевой и химиотерапии, при проблемах с гемоглобином, а также при лейкозах.

Назначается мазок на кровь в том случае, если общий анализ крови показал, что увеличено количественное выражение лейкоцитов, незрелых или атипичных клеток. Для мазка можно использовать биоматериал из крови или капилляров.

Биология и микроскопы

Биология значительно расширяет возможности использования микроскопов. Как уже говорилось раньше, цитология во многом опирается на современные и мощные микроскопы. Микроскопия в биологии открывает для учёных невиданные просторы для опытов и исследований. Современные разработки позволяют уже сейчас говорить о том, какое будущее нас ждёт.

Микроскопия в биологии имеет очень широкое применение. Приборы позволяют исследовать организмы, которые недоступны глазу человека, но очень важны для научных экспериментов. В биологии чаще всего используют метод электронной микроскопии, который даёт изображение за счёт направленного потока электронов. При этом даже световой микроскоп позволяет исследовать живые биологические объекты.

Метод микроскопии в биологии применяется очень активно, так как практически все разновидности применимы для биологических исследований. Интерференционная микроскопия позволяет исследовать прозрачные жидкости и объекты, а также давать их качественный анализ. Это возможно благодаря тому, что луч света, проходя через прибор, раздваивается: одна его часть проходит через объект, а другая - мимо. Таким образом, два луча интерферируют и соединяются, давая полноценное изображение.

Микроскопия в разных областях применения

Область применения микроскопии очень широка. Несмотря на то что изначально микроскопы были предназначены для исследований в области биологии, на сегодняшний день сфера их влияния значительно расширилась. Микроскопия – это комплекс методов, который нашёл своё применение при анализе твёрдых и кристаллических тел, структуре и строений поверхностей. Также микроскопы активно используются в медицине не только для диагностики, но и при выполнении микрохирургических операций. Более того, известно, что учёными был разработан подводный лазерный микроскоп, цель которого состоит в поиске внеземной жизни на Европе.

Также не следует забывать о бурном развитии нанотехнологий, которые немыслимы без микроскопов. Развитие этой отрасли приводит к тому, что разновидности микроприборов постоянно совершенствуются. Более того, появляются новые виды микроскопов, которые предназначены для исследования определённой среды.

Подводя некоторые итоги, следует сказать о том, что микроскопия – это перспективная область, которая с каждым годом развивается всё более активно. Интерес к стволовым клеткам человека, а также развитие нанотехнологий ведёт к тому, что микроскопы становятся неотъемлемой частью любой исследовательской работы.

fb.ru

Лейкоцитарная формула (микроскопия)

При обнаружении клеток в результате указывается их количество на 100 просчитанных клеток (например, 1/100 или 5/100).

Микроскопия окрашенного мазка крови является «золотым стандартом» диагностики.Имеет большое значение в диагностике гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, а также в оценке тяжести состояния и эффективности проводимой терапии.

1. Несоблюдение правил подготовки к исследованию - взятие крови не натощак, сразу же после проведения диагностических процедур (УЗИ, рентгенография и т.п.), после физиотерапевтических процедур.2. Повышенные физические нагрузки, эмоциональное напряжение, беременность.

3. Приём некоторых лекарственных препаратов (сульфаниламидов, нестероидных противовоспалительных средств, левомицетина, тиреостатиков, цитостатиков, кортикостероидов, гепарина, леводопа, фенитоина, вальпроевой кислоты, наркотических анальгетиков).

Единицы измерения

Нейтрофилы: %Эозинофилы: %Базофилы: %Моноциты: %

Лимфоциты: %

Референсные значения

Палочкоядерные нейтрофилы: 1 – 5%

Сегментоядерные нейтрофилы:

Эозинофилы: 0 – 6%Базофилы: 0 – 1,0%

Моноциты:

Лимфоциты:

Повышение

Прием препаратов (леводопа, фенитоин, вальпроевая кислота, наркотические анальгетики)

Снижение

Нейтрофилы: Бактериальные инфекции (брюшной тиф, паратифы, бруцеллез); вирусные инфекции (грипп, корь, ветряная оспа, вирусный гепатит, краснуха); затяжные инфекции у пожилых и ослабленных людей. Гипо- и апластические анемии Наследственные агранулоцитозы Анафилактический шок Тиреотоксикоз Прием цитостатиков Лекарственные нейтропенииЭозинофилы: Тяжелые гнойные инфекции Шок, стресс Отравление солями тяжелых металловМоноциты: Апластическая анемия Волосатоклеточный лейкоз Пиогенные инфекции Роды Оперативные вмешательства Шоковые состояния Приём глюкокортикоидовЛимфоциты: Острые инфекции Милиарный туберкулёз Лимфогранулематоз Системная красная волчанка Апластическая анемия Почечная недостаточность Терминальная стадия онкологических заболеваний Иммунодефициты Рентгенотерапия

Приём цитостатиков

Интерпретация результатов исследований

1. Результаты исследования должны оцениваться в комплексно, т.е. учитывать не только процентное отношение различных популяций лейкоцитов, но и их морфологические изменения, и морфологические изменения эритроцитов.2. Наиболее часто выявляемые изменения морфологии эритроцитов: Изменения размеров (микроцитоз, макроцитоз, мегалоцитоз, анизоцитоз) Изменения формы (пойкилоцитоз, микросфероцитоз, серповидные клетки, мишеневидные клетки, акантоциты, стоматоциты, эллиптоиды, дакриоциты и др.) Изменения окраски (гипохромия, гиперхромия) Включения в эритроцитах (кольца Кебота, тельца Жолли, базофильная зернистость, тельца Гейнца-Эрлиха3. Наиболее часто выявляемые изменения морфологии лейкоцитов: Токсигенная зернистость нейтрофилов Вакуолизация цитоплазмы Тельца Князькова-Деле Гиперсегментация ядер нейтрофилов Пельгеровская аномалия Псевдопельгеровская аномалия Клетки лейколиза4. Некоторые варианты изменения лейкоцитарной формулы:а). Сдвиг влево: большое количество палочкоядерных нейтрофилов, возможно появление метамиелоцитов и миелоцитов. Данные изменения возможны при: Острых инфекционных заболеваниях, сепсисе Ацидозе и коматозных состояниях Физическом перенапряженииб). Сдвиг вправо: в крови появляются гиперсегментированные нейтрофилы, возможно наличие токсигенной зернистости в их цитоплазме. Данные изменения возможны при: Мегалобластной анемии Болезни почек и печени Состояния после переливания крови.

5. Данное исследование обычно назначается вместе с исследованиями 10.001 Общий анализ крови CBC без лейкоцитарной формулы, 10.050 Общий анализ крови CBC/Diff с лейкоцитарной формулой (5 фракций лейкоцитов), 10.200 Скорость оседания эритроцитов (СОЭ).

www.likar.info

Общий анализ крови с "ручной" микроскопией мазка крови

Общий анализ крови – набор тестов, направленных на определение количества различных клеток крови, их параметров (размера, объема) и показателей, отражающих их соотношение и функционирование. Анализ используется для диагностики и контроля лечения многих заболеваний.

Общий анализ кровивключает в себя определение концентрации гемоглобина, количества эритроцитов, их специфических показателей (MCV, MCH, MCHC, RDW), лейкоцитов, тромбоцитов, величины гематокрита, лейкоцитарной формулы, также определяется скорость оседания эритроцитов (СОЭ). Лейкоцитарная формула - процентное соотношение различных видов лейкоцитов (нейтрофилы, лимфоциты, эозинофилы, моноциты, базофилы). Подсчет лейкоформулы проводится на автоматическом гематологическом анализаторе методом многоуглового разделения рассеянного поляризованного света, в сочетании с лазерной проточной цитометрией. Анализатор выдаёт результаты в виде абсолютного (количество клеток в 1 л) и относительного количества (проценты). Параллельно выполняется просмотр мазка крови под микроскопом врачом клинической лабораторной диагностики с дополнительным уточнением лейкоцитарной формулы и описанием морфологии клеток. В этом случае оценивается содержание палочкоядерных нейтрофилов, и других типов клеток в процентном содержании (сегментоядерные нейтрофилы, моноциты, лимфоциты, эозинофилы, базофилы). Исследование лейкоцитарной формулы имеет большое значение в диагностике гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, а также оценке тяжести состояния и эффективности проводимой терапии. В то же время, изменения лейкоцитарной формулы не являются специфичными - они могут иметь сходный характер при разных заболеваниях или, напротив, могут встречаться непохожие изменения при одной и той же патологии у разных больных. Лейкоцитарная формула имеет возрастные особенности, поэтому её сдвиги должны оцениваться с позиции возрастной нормы (это особенно важно при обследовании детей).

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ)- неспецифический показатель воспаления. Определение СОЭ проводится на анализаторе TEСT 1. В основе метода лежит телеметрическое измерение способности эритроцитов к агрегации с помощью измерения оптической плотности. Оптическая плотность автоматически переводится в мм/ч. Измерение агрегации осуществляется в микрокапилляре анализатора, который моделирует кровеносный сосуд. Результаты измерений сопоставимы со значениями, полученными методом Вестергрена.

Общий анализ крови совместно с лейкоцитарной формулой широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний. Изменения, происходящие в периферической крови, неспецифичны, но в то же время отражают изменения, происходящие в целом организме.

Не принимать пищу в течение 8 часов перед исследованием, можно пить чистую негазированную воду. Исключить физическое и эмоциональное перенапряжение и не курить в течение 30 минут до исследования.

Материал для исследования: цельная кровь с ЭДТА.

Общий анализ крови широко используется как один из самых важных методов обследования при большинстве заболеваний. Изменения, происходящие в периферической крови, неспецифичны, но в то же время отражают изменения, происходящие в целом организме.

• Диагностика гематологических, инфекционных, воспалительных заболеваний, оценка тяжести состояния и эффективности проводимой терапии.
• Плановые медицинские осмотры, подготовка к оперативному вмешательству, медкомиссия при устройстве на работу.
• Наличие жалоб на утомляемость, слабость или признаки инфекционного заболевания, воспаления.

Интерпретация результатов содержит аналитическую информацию для лечащего врача. Лабораторные данные входят в комплекс всестороннего обследования пациента, проводимого врачом и не могут быть использованы для самодиагностики и самолечения.

Общий анализ крови самый распространенный лабораторный анализ, используемый для оценки общего состояния здоровья. Множество различных патологических состояний могут приводить к изменениям количества основных клеточных популяций в крови. Общий анализ крови назначается для контроля за эффективностью лечения анемии или инфекционного заболевания, а также для оценки негативного влияния на клетки крови некоторых лекарств.Значительное повышение количества лейкоцитов обычно подтверждает воспаление.

Снижение эритроцитов и гемоглобина свидельствует об анемии и требует дополнительных обследований для уточнения ее причины.С помощью показателя MCV(средний объем эритроцитов) можно провести первичную дифференциальную диагностику анемий:

Ø MCV менее 80 fl (микроцитарная анемия). Причины: железодефицитная анемия, талассемия, анемия хронического заболевания, сидеробластическая анемия.

Поскольку самой частой причиной микроцитарной анемии является дефицит железа, то при выявлении микроцитарной анемии рекомендуется определение концентрации ферритина, трансферрина, а также железа в сыворотке крови. Рекомендуется обратить внимание на показатель RDW(индекс анизоцитоза эритроцитов) (увеличен только при железодефицитной анемии) и количество тромбоцитов (часто увеличено при железодефицитной анемии).

Ø MCV 80-100 fl (нормоцитарная анемия). Причины: кровотечение, анемия при хронической почечной недостаточности, гемолиз.

Ø MCV более 100 fl (макроцитарная анемия). Причины: злоупотребление алкоголем,

лекарственные препараты (гидроксимочевина, зидовудин), дефицит витамина B12 и фолиевой кислоты.

Повышение уровня гемоглобина:

§ эритремия.

Повышение концентрации эритроцитов:

§ обезвоживание (при выраженной диарее, рвоте, повышенном потоотделении, диабете, ожоговой болезни, перитоните);

§ физиологические эритроцитозы (у жителей высокогорья, лётчиков, спортсменов);

§ симптоматические эритроцитозы (при недостаточности дыхательной и сердечно-сосудистой системы, поликистозе почек);

§ эритремия.

Повышение гематокрита:

§ обезвоживание (при выраженной диарее, рвоте, повышенном потоотделении, диабете, ожоговой болезни, перитоните);

§ физиологические эритроцитозы (у жителей высокогорья, лётчиков, спортсменов);

§ симптоматические эритроцитозы (при недостаточности дыхательной и сердечно-сосудистой системы, поликистозе почек);

§ эритремия.

Понижение гематокрита:

§ анемии различной этиологии;

§ гипергидратация.

Повышение значений МСН:

§ апластическая анемия;

§ заболевания печени;

§ гипотиреоз;

§ аутоиммунные анемии;

§ курение и употребление алкоголя.

Понижение MCH:

§ железодефицитная анемия;

Следует учитывать, что величина MCH не является специфическим, показатель следует использовать для диагностики анемий только в комплексе с другими показателями общего анализа крови и биохимического исследования крови.

Повышение значений MCHC (средняя концентрация гемоглобина в эритроцитах):

§ наследственная микросфероцитарная анемия.

Понижение значений МСНС:

§ железодефицитная анемия;

§ анемия хронических заболеваний;

§ некоторые виды гемоглобинопатий.

Следует учитывать, что величина MCHC не является специфическим, показатель следует использовать для диагностики анемий только в комплексе с другими показателями общего анализа крови и биохимического исследования крови.

Повышение концентрации тромбоцитов:

§ физическое перенапряжение;

§ воспалительные заболевания, острые и хронические;

§ гемолитические анемии;

§ анемии вследствие острой или хронической кровопотери;

§ состояния после перенесённых хирургических вмешательств;

§ состояние после спленэктомии;

§ онкологические заболевания, в том числе, и гемобластозы.

Понижение концентрации тромбоцитов:

§ беременность;

§ В12-дефицитная и фолиеводефицитная анемия;

§ апластическая анемия;

§ приём лекарственных препаратов, угнетающих продукцию тромбоцитов;

§ врождённые тромбоцитопении;

§ спленомегалия;

§ аутоиммунные заболевания;

§ состояния после перенесённых массивных гемотрансфузий.

Повышение концентрации лейкоцитов:

§ физиологический лейкоцитоз (эмоциональные и физические нагрузки, воздействие солнечного света, холода, приём пищи, беременность, менструация);

§ воспалительные процессы;

§ вирусные и бактериальные инфекции;

§ состояния после перенесённых операционных вмешательств;

§ интоксикации;

§ ожоги и травмы;

§ инфаркты внутренних органов;

§ злокачественные новообразования;

§ гемобластозы.

Понижение концентрации лейкоцитов:

§ вирусные и некоторые хронические инфекции;

§ приём лекарственных препаратов (антибиотики, цитостатики, нестероидные противовоспалительные средства, тиреостатики и др.);

§ аутоиммунные заболевания;

§ воздействие ионизирующего излучения;

§ истощение и кахексия;

§ анемии;

§ спленомегалия;

§ гемобластозы.

Скорость оседания эритроцитов (СОЭ): показатель СОЭ меняется в зависимости от множества физиологических и патологических факторов. Значения СОЭ у женщин несколько выше, чем у мужчин. Изменения белкового состава крови при беременности ведут к повышению СОЭ в этот период.

Изменение СОЭ может служить косвенным признаком текущего воспалительного или иных патологических процессов, таких как злокачественные опухоли и диффузные заболевания соединительной ткани.

Основным фактором, влияющим на образование, определяющим СОЭ, является белковый состав плазмы крови. Острофазовые белки (СРБ, альфа-1-антитрипсин, гаптоглобин) адсорбируясь на поверхности эритроцитов, снижают их заряд и отталкивание друг от друга, способствуют образованию «монетных столбиков» и ускоренному оседанию эритроцитов. При острых воспалительных и инфекционных процессах изменение СОЭ отмечается через 24 часа после повышения температуры и увеличения количества лейкоцитов. При хроническом воспалении повышение СОЭ обусловлено увеличением концентрации фибриногена и иммуноглобулинов. Определение СОЭ в динамике, в комплексе с другими тестами используют при контроле эффективности лечения воспалительных и инфекционных заболеваний.

Выраженное повышение СОЭ (60-80 мм/ч) характерно для парапротеинемических гемобластозов (миеломная болезнь, болезнь Вальдстрема).

Клинический анализ крови с лейкоцитарной формулой и СОЭ – это скрининговый метод, с помощью которого можно заподозрить или исключить многие заболевания. Этот анализ, однако, не всегда позволяет установить причину изменений, при выявлении которых, как правило, требуются дополнительные лабораторные, в том числе патоморфологические и гистохимические исследования. Наиболее точная информация может быть получена при динамическом наблюдении изменений показателей крови.

medlabexpress.perm.ru